Anticuerpo monoclonal PE conejo anti-humano CD361 para FC - P34910

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EVI2B / CD361

• Codificado por el gen EVI2B, CD361 es una glicoproteína transmembrana también conocida como homólogo de la proteína del sitio 2B de integración viral ecotrópica; el splicing alternativo genera múltiples isoformas.
• Desempeña un papel esencial en la diferenciación de granulocitos y la funcionalidad de las células progenitoras hematopoyéticas, influyendo en la progresión del ciclo celular y la supervivencia.
• Se localiza en la membrana como proteína de hélice transmembrana de un solo paso, lo que concuerda con su participación en la señalización extracelular o la adhesión celular.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada y fosforilación, que pueden regular su estabilidad, localización o funciones de señalización.
• Clasificado como protooncogen; su desregulación está relacionada con neoplasias hematopoyéticas, aunque los mecanismos oncogénicos precisos aún se encuentran en investigación.
• Se expresa de forma generalizada en médula ósea, células mononucleares de sangre periférica, fibroblastos y líneas linfoblastoides transformadas por EBV; muestra una expresión fuerte en células granulocíticas y una expresión más débil en linfocitos.
• Contiene un péptido señal para su direccionamiento a la vía secretora y presenta un dominio transmembrana necesario para el anclaje a la membrana.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre la región extracelular (aminoácidos 22–199) de CD361, por lo que este anticuerpo es ideal para detectar proteínas expresadas en superficie en ensayos de citometría de flujo con células vivas.
• Para FC, se recomienda titular el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo de célula específico y su configuración experimental; un rango inicial de 0,5–5 µg por millón de células suele ser útil para anticuerpos conjugados.
• Valide el anticuerpo en el sistema de muestras correspondiente (por ejemplo, PBMC humanas, líneas celulares granulocíticas) e incluya controles adecuados, como células sin tinción y anticuerpos conjugados con PE de isotipo coincidente, para garantizar la especificidad.
• Dado que la expresión de CD361 es más fuerte en granulocitos, el pre-enmascaramiento (pre-gating) con marcadores granulocíticos o el uso de centrifugación en densidad para enriquecer granulocitos puede mejorar la resolución de la señal.
• Las condiciones de preparación de la muestra (por ejemplo, fijación, permeabilización) deben optimizarse para la tinción de superficie si se ve afectada la viabilidad, aunque se recomienda la tinción de células vivas para este anticuerpo dirigido contra el dominio extracelular.

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