Anticuerpo monoclonal de conejo PE anti-CD4 humano para FC - P01730

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD4 (glucoproteína de superficie de las células T CD4)

• CD4 es una glucoproteína integral de membrana que actúa como correceptor de las moléculas del MHC de clase II y desempeña un papel fundamental en la activación de las células T y las respuestas inmunitarias.
• Al interactuar con el complejo péptido-MHC de clase II, CD4 recluta la cinasa Src LCK al complejo TCR-CD3, iniciando cascadas de señalización intracelular que promueven la producción de linfocinas, la adhesión y la diferenciación de las células T colaboradoras.
• CD4 también se expresa en otras células inmunitarias, incluidos macrófagos, células dendríticas y células NK, donde modula la diferenciación, la expresión de citocinas y la migración mediante vías independientes del TCR.
• CD4 es el receptor principal del virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1), al unirse a la glucoproteína de la envoltura viral gp120, y es regulado negativamente por la proteína accesoria Vpu del VIH-1.
  Referencias relacionadas: PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026, PMID:17346169
• Además, CD4 actúa como receptor del herpesvirus humano 7 (HHV-7).
  Referencias relacionadas: PMID:7909607
• La proteína se expresa en gran medida en la superficie de las células T colaboradoras, especializadas en regular la actividad de las células T citotóxicas, la maduración de las células B y la activación de los fagocitos.
• CD4 es una proteína de membrana de tipo I de paso único, con cuatro dominios extracelulares similares a las inmunoglobulinas, anclada a la membrana celular mediante una hélice transmembrana.
• Entre las modificaciones postraduccionales se incluyen la glucosilación ligada a N, la palmitoilación de las cisteínas cercanas a la membrana y la fosforilación de la cola citoplasmática, que regulan la agrupación de los receptores y la señalización.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno, que comprende los aminoácidos 26–207, corresponde al dominio extracelular de CD4, incluidos los dominios similares a las inmunoglobulinas del extremo N-terminal responsables de la unión al MHC de clase II y a gp120 del VIH. Los investigadores deben considerar posibles efectos de competencia o bloqueo en los ensayos funcionales.
• Para la citometría de flujo, titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima de tinción para su tipo celular específico y sus condiciones experimentales. Utilice controles de isotipo adecuados y colorantes de viabilidad para excluir las células muertas.
• Valide la especificidad del anticuerpo utilizando líneas celulares T humanas CD4 positivas (p. ej., Jurkat) o células mononucleares de sangre periférica (PBMC). Los modelos knockout o knockdown pueden utilizarse como controles negativos.
• El conjugado PE proporciona una señal intensa para la tinción de superficie; asegúrese de realizar una compensación adecuada al utilizar paneles multicolor, especialmente con otros anticuerpos conjugados con PE.

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