Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD52 humano conjugado con PE para citometría de flujo - P31358

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD52

• CD52, también conocido como antígeno CAMPATH-1, HE5, CDW52 y EDDM5, es una glucoproteína anclada a GPI que se encuentra predominantemente en la membrana celular.
• La proteína se expresa como un péptido maduro pequeño con un peso molecular de aproximadamente 7 kDa, anclado a la bicapa lipídica mediante un grupo de glucosilfosfatidilinositol (GPI).
• Los estudios funcionales sugieren que CD52 puede desempeñar un papel en la presentación y orientación de carbohidratos, aunque su función biológica precisa aún no se ha elucidado por completo.
• CD52 se identificó originalmente como el antígeno Cambridge pathology 1 y también se reconoce como una proteína secretora epididimaria (HE5), lo que indica funciones específicas en el tejido del epidídimo.
• La región extracelular N-terminal, que incluye el péptido inmunógeno utilizado, es accesible para la unión de anticuerpos, lo que convierte a CD52 en una diana adecuada para la detección mediante citometría de flujo en células vivas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glucosilación ligada a N, y la proteína está unida a la membrana exclusivamente mediante un anclaje GPI, por lo que se clasifica como una lipoproteína.
• Las palabras clave asociadas con CD52 incluyen secuenciación directa de proteínas, estructura 3D y proteoma de referencia, lo que refleja sus propiedades bioquímicas bien caracterizadas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1–61) de CD52 humano, que es extracelular y está expuesta en células intactas, lo que respalda la idoneidad del anticuerpo para la citometría de flujo en células vivas.
• Al ser un anticuerpo primario conjugado con PE, no se requiere tinción secundaria; la detección directa permite simplificar el diseño de paneles multicolor en los experimentos de citometría de flujo.
• Considere titular el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo celular e instrumento específicos, e incluya controles de isotipo adecuados para evaluar la unión inespecífica.
• Valide la reactividad del anticuerpo en células conocidas como positivas para CD52, tales como linfocitos humanos o líneas celulares epiteliales epididimarias, e incluya un control negativo (por ejemplo, células con CD52 eliminado o células no humanas) para confirmar la especificidad.
• Para la tinción de la superficie celular, incube con el anticuerpo a 4 °C en presencia de un bloqueo de Fc para reducir el posible fondo antes de la adquisición mediante citometría de flujo.

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