Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD8b humano conjugado con PE para citometría de flujo - P10966

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del CD8b

• El CD8b, también conocido como cadena beta del CD8, es una glicoproteína de superficie de células T perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas. Existe en múltiples isoformas (isoforma 1, 3, 5, 6, 7, 8) generadas por empalme alternativo.
• El CD8b forma heterodímeros con la cadena alfa del CD8 y funciona como un correceptor para los complejos MHC clase I:péptido en las células presentadoras de antígeno.
• Tras unirse al MHC clase I, el CD8b recluta la quinasa Src LCK al complejo TCR-CD3, iniciando cascadas de señalización intracelular que promueven la activación, proliferación y función citotóxica de las células T.
• La cola citoplasmática del CD8b contiene un sitio de palmitoilación que dirige la proteína hacia las balsas lipídicas, concentrando moléculas de señalización y mejorando la eficiencia de la transducción de señales.
• El CD8b es crítico para la selección tímica de las células T CD8+, asegurando el desarrollo adecuado del repertorio de linfocitos T citotóxicos.
• Subcelularmente, el CD8b se localiza principalmente en la membrana plasmática, pero también se han detectado isoformas secretadas.
• La expresión tisular está restringida al timo y a las células T CD8+ periféricas, con ciertas isoformas mostrando expresión preferencial en poblaciones tímicas versus periféricas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada, formación de enlaces disulfuro y fosforilación, que pueden regular la estabilidad de la proteína y sus propiedades de interacción.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno fue diseñado contra el dominio extracelular (aa 22-170) del CD8b humano, abarcando el dominio tipo V similar a inmunoglobulina crítico para la interacción con el MHC I, lo que lo hace adecuado para detectar el CD8b expresado en superficie mediante citometría de flujo.
• Dado que este anticuerpo está validado para citometría de flujo, considere usarlo para inmunofenotipado de subpoblaciones de células T, pero realice experimentos de titulación para determinar la concentración óptima.
• Dado que el anticuerpo está conjugado directamente con PE (ficoeritrina), asegure configuraciones de compensación adecuadas en paneles de citometría de flujo multicolor, especialmente al co-teñir con FITC o APC.
• Para otras aplicaciones como Western blot o inmunohistoquímica, el anticuerpo puede requerir revalidación, ya que el conjugado PE y el reconocimiento del antígeno pueden comportarse de manera diferente.
• Utilice controles de isotipo apropiados y colorantes de viabilidad en experimentos de citometría de flujo para discriminar la tinción específica de CD8b del fondo.

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