Anticuerpo monoclonal PE de conejo anti-Complemento C3 humano para FC - P01024

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del Complemento C3

• C3 es una proteína precursora de ~187 kDa que se escinde postraduccionalmente en los fragmentos funcionales C3a (anafilatoxina) y C3b (opsonina). El fragmento C3b contiene un enlace tioéster reactivo que permite su unión covalente a las superficies de los patógenos.
  Referencias relacionadas:
  PMID:6903192

• C3b opsoniza patógenos y actúa como componente no enzimático de la C5 convertasa tanto en la vía clásica como en la vía alternativa del complemento, siendo fundamental para la fagocitosis y la eliminación inmune.
  Referencias relacionadas:
  PMID:28264884, PMID:31507604, PMID:3653927, PMID:12878586, PMID:18204047, PMID:2387864

• La anafilatoxina C3a media la inflamación local al unirse a su receptor C3AR1, desencadenando la desgranulación de mastocitos y basófilos, la liberación de citoquinas y la señalización a través de receptores acoplados a proteínas G.
  Referencias relacionadas:
  PMID:6968751, PMID:37169960, PMID:37852260, PMID:8702752, PMID:23383423

• C3a también actúa como un potente quimioatrayente para macrófagos y neutrófilos, dirigiendo su migración hacia los tejidos inflamados.
  Referencias relacionadas:
  PMID:23383423, PMID:342601, PMID:5778786

• Más allá de la inmunidad, C3 (también conocido como proteína estimuladora de la acilación, ASP) funciona como una hormona adipogénica que estimula la síntesis de triglicéridos y el transporte de glucosa en adipocitos a través del receptor C5AR2, regulando así la eliminación de lípidos postprandial.
  Referencias relacionadas:
  PMID:10432298, PMID:15833747, PMID:16333141, PMID:11773063, PMID:12540846, PMID:19615750

• C3 se secreta principalmente al plasma y es producido por hepatocitos y adipocitos. Después de la activación del complemento, C3b se deposita en las superficies celulares, lo que permite su detección por citometría de flujo en los tipos celulares relevantes.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 1498–1663 del C3 humano, una región dentro del dominio C-terminal C345C involucrado en la unión a C5 y la formación de la convertasa. Este diseño puede favorecer la detección de C3 de longitud completa y la cadena α' de C3b.
• Al ser un anticuerpo conjugado con PE, está listo para su uso directo en citometría de flujo sin necesidad de reactivos secundarios. Para obtener una señal óptima, titule el anticuerpo (por ejemplo, 0,5–5 µg por 10^6 células) e incluya controles de isotipo apropiados.
• Dado que C3 es una proteína secretada, considere la fijación y permeabilización si requiere tinción intracelular de las células productoras de C3 (por ejemplo, hepatocitos, adipocitos). Para la detección superficial de depósitos de C3b en células diana, no es necesaria la permeabilización.
• Valide el ensayo en su sistema de muestra específico, como sangre entera humana, células mononucleares de sangre periférica (CMNP) o poblaciones celulares purificadas, y confirme que la reactividad cruzada está restringida al C3 humano como se indica.

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