Anticuerpo monoclonal PE de conejo contra HIF-1 alfa humano para FC (intra) - Q16665

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de HIF-1 alfa

• HIF-1 alfa actúa como regulador transcripcional maestro de la respuesta adaptativa a la hipoxia, activando más de 40 genes entre los que se incluyen eritropoyetina, VEGF, enzimas glucolíticas y transportadores de glucosa para aumentar el aporte de oxígeno y facilitar la adaptación metabólica. Referencias relacionadas: PMID:11292861 PMID:11566883 PMID:15465032
• Forma heterodímeros con ARNT y el complejo se une al elemento de respuesta a hipoxia (HRE) en los promotores de genes diana. La activación transcripcional requiere el reclutamiento de coactivadores como CREBBP y EP300. Referencias relacionadas: PMID:16543236 PMID:9887100
• La actividad de HIF-1 alfa se ve potenciada por la interacción con los coactivadores NCOA1 y NCOA2, y el regulador redox APEX1 potencia aún más su activación. Referencias relacionadas: PMID:10594042 PMID:10202154
• Desempeña un papel esencial en la vascularización embrionaria, la angiogénesis tumoral y la fisiopatología de las enfermedades isquémicas. Referencias relacionadas: PMID:22009797
• Participa en la distribución axonal y el transporte de mitocondrias en neuronas durante la hipoxia. Referencias relacionadas: PMID:19528298
• Tras la infección por SARS-CoV-2, HIF-1 alfa es necesario para la inducción de la glucólisis en monocitos, promoviendo un estado proinflamatorio y aumentando la replicación viral. Referencias relacionadas: PMID:32697943
• Se localiza en el citoplasma, el núcleo y las gránulas nucleares, dependiendo de los niveles de oxígeno.
• Se expresa en la mayoría de tejidos, con niveles más altos en riñón y corazón; con frecuencia se sobreexpresa en cánceres humanos debido a la hipoxia intratumoral.
• Sufre extensas modificaciones postraduccionales que incluyen hidroxilación, acetilación, fosforilación y ubiquitinación, que regulan su estabilidad y actividad. Está sujeto a splicing alternativo, que produce isoformas con actividades distintas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido interno (aa 401-500); asegure la permeabilización para el tinte de citometría de flujo intracelular.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en líneas celulares humanas relevantes en condiciones hipóxicas versus normóxicas para confirmar la expresión inducible por hipoxia.
• Realice una titulación del anticuerpo para determinar la concentración óptima para FC (intra) y minimizar el fondo de señal, maximizando la señal específica.
• Utilice controles de isotipo y controles de compensación adecuados al realizar citometría de flujo multicolor.
• Considere la posibilidad de realizar pruebas en células con knockout o knockdown de HIF-1 alfa como control de especificidad.

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