Anticuerpo monoclonal PE Conejo anti-Humano NT5E/CD73 para citometría de flujo - P21589

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NT5E/CD73

• NT5E/CD73, también conocida como ecto-5'-nucleotidasa, es una proteína de membrana celular anclada a glicosilfosfatidilinositol (GPI) que cataliza la hidrólisis de nucleótidos monofosfato extracelulares en sus nucleósidos correspondientes y fosfato inorgánico.
• La enzima muestra preferencia por el AMP como sustrato, pero también puede hidrolizar IMP, UMP, GMP, CMP y nucleótidos monofosfato de desoxirribosa como dAMP, dCMP y dTMP. Referencias relacionadas: PMID:21933152, PMID:22997138, PMID:23142347
• NT5E muestra selectividad por los nucleótidos monofosfato de ribosa sobre las formas de desoxirribosa. Referencias relacionadas: PMID:34403084
• La proteína se localiza en la membrana celular donde regula la señalización purinérgica al convertir el AMP extracelular en adenosina, un metabolito inmunosupresor potente.
• NT5E es un miembro de la familia de las 5'-nucleotidasas y requiere iones de zinc para su actividad hidrolítica, como lo indican los dominios de unión a metales.
• El empalme alternativo del gen NT5E produce múltiples variantes de transcripción, aunque la importancia funcional de todas las isoformas no está completamente caracterizada.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada, formación de enlaces disulfuro y la adición de un anclaje GPI que sujeta la enzima a la superficie celular.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo monoclonal conjugado con PE está diseñado para la detección directa por citometría de flujo del CD73 en la superficie de células humanas vivas. Asegúrese de que las células sean viables para preservar la integridad de la membrana y la presentación óptima del epítopo.
• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (a.a. 27-547), por lo que se espera que el anticuerpo reconozca un epítopo accesible en la superficie celular sin necesidad de permeabilización.
• Para obtener mejores resultados, valore el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo celular específico y condiciones de tinción. Típicamente, 0.1–1 µg por 1×10^6 células es un rango inicial razonable.
• Incluya controles de isotipo apropiados y controles de compensación al realizar citometría de flujo multicolor para tener en cuenta la unión inespecífica y la superposición espectral.
• La expresión de CD73 puede estar modulada por la activación celular; considere validar el anticuerpo en muestras tanto en reposo como estimuladas, si es relevante para su estudio.

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