Anticuerpo Monoclonal de Conejo anti-Humano RANKL/CD254 Conjugado con PE para Citometría de Flujo (Intracelular) - O14788

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RANKL/CD254

• TNFSF11, también conocido como RANKL, OPGL, ODF, TRANCE y CD254, es un miembro de la superfamilia de ligandos del factor de necrosis tumoral (TNF) (UniProt: O14788).
• Funciona como una citocina clave al unirse a TNFRSF11A/RANK y TNFRSF11B/OPG, actuando como un factor de diferenciación y activación de osteoclastos. Referencias relacionadas: PMID:22664871
• En el sistema inmunitario, RANKL mejora la estimulación mediada por células dendríticas de la proliferación de células T naïve y regula las interacciones entre células T y células dendríticas (Por similitud).
• Induce la osteoclastogénesis a través de la activación de vías de señalización que conducen a la translocación nuclear de NFATC1 y la transcripción de genes específicos de osteoclastos; también induce la activación de CREB1 y ROS mitocondriales a través del eje TMEM64-ATP2A2 (Por similitud).
• A nivel subcelular, RANKL existe como una proteína transmembrana en la membrana celular, pero también puede ser escindida y secretada, detectándose en formas citoplasmáticas y secretadas.
• La expresión más alta se encuentra en los ganglios linfáticos periféricos, con una expresión más débil en el bazo, leucocitos de sangre periférica, médula ósea, corazón, placenta, músculo esquelético, estómago y tiroides.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glicosilación, y el empalme alternativo produce múltiples isoformas, contribuyendo a su diversidad funcional; las mutaciones en TNFSF11 se asocian con la osteopetrosis.
• Las palabras clave incluyen citocina, membrana, empalme alternativo, proteína del desarrollo, glucoproteína, ancla de señal y hélice transmembrana.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio extracelular (aa 136-317), lo que puede reconocer tanto RANKL unido a membrana como soluble. Para la citometría de flujo intracelular, asegure una permeabilización celular adecuada y considere incluir controles no estimulados.
• Como anticuerpo conjugado con PE, protégalo de la luz y evite ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener la intensidad de la fluorescencia y la integridad del anticuerpo.
• Valide el rendimiento en modelos celulares relevantes como células T activadas, precursores de osteoclastos o líneas celulares que expresen RANKL. Titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima de tinción para su sistema específico.
• Si se utiliza en combinación con otros fluoróforos, diseñe cuidadosamente los controles de compensación para evitar artefactos de superposición espectral.

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