Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Siglec-8 humano conjugado con PE para FC - Q9NYZ4

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de Siglec-8

• Siglec-8, también conocida como SAF-2 (miembro 2 de la familia de las sialoadhesinas), es una glucoproteína de membrana de tipo I de paso único que pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas. El splicing alternativo genera múltiples isoformas.
• Siglec-8 media la adhesión dependiente del ácido siálico a las células sanguíneas, uniéndose preferentemente al ácido siálico ligado mediante enlaces α-2,3, con cierta afinidad por los enlaces α-2,6; las interacciones en cis sobre la superficie de la misma célula pueden enmascarar el sitio de unión al ligando. Referencias relacionadas: PMID:10625619, PMID:10856141
• Reconoce específicamente el ácido N-acetilneuramínico terminal (ácido siálico) y la galactosa 6-O-sulfatada subyacente, con una marcada preferencia por los epítopos de glicanos sialil-Lewis X con galactosa 6-sulfatada. Referencias relacionadas: PMID:27357658
• La proteína se expresa predominantemente en la superficie de eosinófilos, basófilos y mastocitos, lo que la convierte en un marcador específico de estos tipos celulares en estudios hematopoyéticos.
• La localización subcelular es principalmente la membrana plasmática, en consonancia con su función en las interacciones célula-célula y la señalización.
• Siglec-8 contiene dominios similares a inmunoglobulinas y enlaces disulfuro, características típicas de las moléculas de adhesión, y se modifica postraduccionalmente mediante glicosilación.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aminoácidos 17-363), lo que sugiere que el anticuerpo probablemente reconoce epítopos expuestos en la superficie, por lo que es adecuado para citometría de flujo en células vivas no permeabilizadas.
• Para aplicaciones de citometría de flujo, ajuste la titulación del anticuerpo conjugado con PE para determinar la concentración óptima de tinción utilizando líneas celulares relevantes o células primarias que expresen Siglec-8 (por ejemplo, poblaciones de eosinófilos, basófilos o mastocitos).
• Incluya controles de isotipo adecuados y pasos de bloqueo de los receptores Fc para minimizar la unión inespecífica.
• Valide la especificidad de la tinción en el sistema de muestras previsto, teniendo en cuenta la expresión descrita de Siglec-8 en basófilos, eosinófilos y mastocitos humanos.
• Tenga en cuenta que existen múltiples isoformas proteicas (44, 46 y 54 kDa), pero el conjugado con PE está diseñado para la detección en la superficie celular y no distinguirá las variantes de peso molecular.

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