Anticuerpo monoclonal de conejo anti-TIGIT humano conjugado con PE para citometría de flujo - Q495A1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de TIGIT

• TIGIT (receptor inmunitario de células T con dominios Ig e ITIM) es un receptor inhibidor de la superfamilia de inmunoglobulinas, también conocido como VSIG9 y VSTM3, que modula las respuestas inmunitarias principalmente suprimiendo la activación de las células T mediante la promoción de células dendríticas inmunorreguladoras maduras. Referencias relacionadas: PMID:19011627
• Se une con alta afinidad al receptor de poliovirus PVR/CD155 y a nectina-2/CD112 en células presentadoras de antígeno, entregando señales inhibitorias a células T y células NK; el compromiso del ligando desencadena la fosforilación de su cola citoplasmática por las quinasas Src FYN o LCK, reclutando GRB2 y la fosfatasa SHIP1 para amortiguar las vías de PI3K y MAPK. Referencias relacionadas: PMID:23154388
• Además, TIGIT se asocia con β-arrestina-2/ARRB2 para reclutar SHIP1, lo que suprime la auto-ubiquitinación de TRAF6 y, en consecuencia, inhibe la cascada de señalización de NF-κB. Referencias relacionadas: PMID:24817116
• También actúa como un receptor funcional para la nectina-4 para inhibir la citotoxicidad de las células NK, expandiendo su repertorio de puntos de control inmunitario. Referencias relacionadas: PMID:32503945
• A nivel proteico, TIGIT se expresa en niveles bajos en células T CD4+ de memoria periférica y reguladoras, y en células NK, y se regula notablemente al alza tras la activación de estas células.
• Subcelularmente, se localiza en la membrana celular como una proteína transmembrana de paso único tipo I.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, formación de enlaces disulfuro y fosforilación, que son esenciales para sus funciones de señalización.
• El empalme alternativo genera isoformas del receptor, y la proteína es miembro del proteoma de referencia con una masa molecular calculada de aproximadamente 26.3 kDa.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo monoclonal de conejo conjugado con PE está diseñado para la detección directa por citometría de flujo (CF) de TIGIT humano en células vivas; no se requiere tinción secundaria.
• Dado que el inmunógeno recombinante abarca el dominio extracelular (aminoácidos 22–141), es probable que el anticuerpo reconozca un epítopo dentro de la región de unión al ligando; considere realizar experimentos de bloqueo con PVR/CD155 o nectina-2 para confirmar la especificidad.
• Dado que la expresión de TIGIT es baja en células en reposo y se regula al alza tras la activación, incluya un paso de activación apropiado (por ejemplo, estimulación con anti-CD3/CD28 para células T o IL-2 para células NK) para maximizar la señal.
• Valore el anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima para su tipo celular específico y condiciones de ensayo, e incluya siempre controles de isotipo apropiados.

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