Anticuerpo monoclonal PE de conejo anti-CD18 humano/macaco para citometría de flujo - P05107

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la integrina beta-2

• La integrina beta-2 (CD18) forma receptores heterodiméricos con integrinas alfa (CD11a-d), se une a ICAM, iC3b, fibrinógeno y VCAM1, y regula la adhesión y comunicación de los leucocitos (PubMed:1676048, PubMed:23775590, PubMed:10438935, PubMed:8777714, PubMed:9841932, PubMed:38195629). Referencias relacionadas: PMID:1676048 | PMID:23775590 | PMID:10438935 | PMID:8777714 | PMID:9841932 | PMID:38195629
• Esta integrina media la transmigración de leucocitos y la adhesión de linfocitos T y neutrófilos, esencial para el tráfico de células inmunitarias y la inflamación (PubMed:11812992, PubMed:28807980, PubMed:18587400). Referencias relacionadas: PMID:11812992 | PMID:28807980 | PMID:18587400
• CD18 participa en la eliminación fagocítica mediante el reconocimiento de ICAM3 en neutrófilos apoptóticos e ICAM4 en eritrocitos, así como en la citotoxicidad de las células asesinas naturales (PubMed:23775590, PubMed:16985175, PubMed:15356110). Referencias relacionadas: PMID:23775590 | PMID:16985175 | PMID:15356110
• La integrina β2 actúa como receptor de señalización en la sinapsis inmunológica, donde la unión de LFA-1 a ICAM1 acopla la estimulación del TCR a la fuerza de adhesión (PubMed:38195629). Referencias relacionadas: PMID:38195629
• Es una glicoproteína transmembrana que contiene dominios similares a EGF, sitios de unión a calcio y magnesio, se expresa en todos los leucocitos, con niveles altos en neutrófilos; las mutaciones causan deficiencia de adhesión de leucocitos tipo 1.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca todo el dominio extracelular (aa 1-769) de CD18 humano, lo que sugiere que el anticuerpo probablemente se dirige a un epitopo expuesto en la superficie adecuado para citometría de flujo de células vivas.
• Para citometría de flujo, titule el anticuerpo conjugado con PE en tipos de células relevantes (por ejemplo, PBMC humanas) para determinar la concentración óptima de tinción y minimizar el fondo.
• Incluya un control de isotipo adecuado y discriminación entre células vivas y muertas para garantizar la detección específica de leucocitos CD18+.
• Valide la reactividad cruzada con macaco cangrejero probando en PBMC o leucocitos aislados de esta especie.
• Dado que CD18 se expresa altamente en neutrófilos, prebloquee los receptores Fc o use reactivos de bloqueo de FcR para reducir la unión no específica.
• La etiqueta PE permite la detección con un solo láser; ajuste la compensación si realiza multiplexación con otros fluorocromos.

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