Anticuerpo monoclonal PE de conejo anti-HLA-DR humano/mono para citometría de flujo - P01903

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HLA-DR

• HLA-DRA codifica la cadena alfa de la molécula HLA-DR del MHC de clase II. Forma un heterodímero con la cadena beta para presentar péptidos antigénicos en las CPA profesionales a las células T CD4+, guiando las funciones efectoras de los linfocitos T cooperadores.
  Referencias relacionadas:
  PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368

• Normalmente presenta péptidos extracelulares de 10 a 30 aminoácidos generados a partir de antígenos endocitados en lisosomas, con un residuo anclaje hidrofóbico grande esencial en la posición 1 del péptido para la unión al MHCII.
  Referencias relacionadas:
  PMID:8145819

• En el microambiente tumoral, HLA-DR presenta péptidos de las CPA residentes en el tumor mediante fagocitosis de células tumorales apoptóticas o macropinocitosis de proteínas secretadas.
  Referencias relacionadas:
  PMID:31495665

• También presenta autopéptidos intracelulares mediante macroautofagia, un proceso crucial para la selección de células T tímicas y la tolerancia central.
  Referencias relacionadas:
  PMID:17182262, PMID:23783831

• La selección de epítopes inmunodominantes implica dos modos de procesamiento: 'unir primero, cortar/recortar después' para péptidos extraños y 'cortar primero, unir después' para autopéptidos.
  Referencias relacionadas:
  PMID:25413013

• A nivel subcelular, HLA-DR se localiza en la membrana celular, retículo endoplásmico, endosomas tempranos/tardíos, lisosomas y autofagosomas.

• A nivel de proteína, se expresa en las CPA profesionales (macrófagos, células dendríticas, linfocitos B) y células epiteliales tímicas.
  Referencias relacionadas:
  PMID:15322540, PMID:23783831, PMID:31495665

• Las modificaciones postraduccionales incluyen enlaces disulfuro y glicosilación N-ligada; es una glicoproteína transmembrana de una sola pasada.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para citometría de flujo, este anticuerpo conjugado con PE se puede usar para la tinción de inmunofluorescencia directa de células vivas que expresan HLA-DR. Titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su muestra e instrumento específicos.
• El inmunógeno es la proteína recombinante de longitud completa de HLA-DR humano, lo que sugiere que el anticuerpo probablemente reconoce la conformación nativa en la superficie celular. Se ha confirmado la reactividad cruzada con el mono cynomolgo; por lo tanto, se puede aplicar en estudios inmunológicos de primates no humanos.
• Valide la tinción con controles de isotipo y tinturas de viabilidad apropiados en su sistema experimental. Considere realizar pasos de bloqueo para reducir la unión no específica si es necesario.
• Para obtener los mejores resultados, asegúrese de mantener las muestras en frío y analizarlas inmediatamente después de la tinción para mantener la integridad del antígeno de superficie.

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