Anticuerpo Monoclonal de Conejo anti-Ratón TNF-α conjugado con PE para Citometría de Flujo (Intracelular) - P06804

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del TNF-α

• Identidad de la proteína: El factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α), también conocido como caquectina o TNFSF2, es una potente citocina proinflamatoria.
• Función principal: Se une a TNFRSF1A/TNFR1 y TNFRSF1B/TNFBR, mediando diversas respuestas celulares que incluyen apoptosis, proliferación celular y diferenciación.
• Papel inmunitario: Secretado principalmente por macrófagos; actúa como un pirógeno endógeno que causa fiebre directamente o mediante la inducción de interleucina-1, y contribuye a la caquexia en la inflamación crónica.
• Efectos metabólicos: Induce resistencia a la insulina al inhibir la fosforilación de tirosina de IRS1 inducida por insulina y la captación de glucosa en adipocitos, parcialmente a través de la degradación de la proteína GKAP42. Referencias relacionadas: PMID:25586176
• Remodelación ósea: Promueve la osteoclastogénesis, mediando así la reabsorción ósea. Referencias relacionadas: PMID:32741026
• Angiogénesis: Desempeña un papel en la angiogénesis al inducir sinérgicamente la producción de VEGF con IL-1β e IL-6.
• Función del isoforma: La forma del dominio intracelular (ICD) del factor de necrosis tumoral induce la producción de IL-12 en células dendríticas.
• Localización subcelular: Existe como un precursor anclado a la membrana (proteína transmembrana de tipo II) y una forma soluble secretada después de la escisión proteolítica.
• Modificaciones postraduccionales: Las características incluyen glicosilación N-ligada, un enlace disulfuro, lipidación (miristoilación) y fosforilación; estas regulan el tráfico y la actividad.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo monoclonal de conejo conjugado con PE está diseñado para citometría de flujo intracelular (FC). Se requiere la permeabilización de las células para detectar el TNF-α intracelular.
• Considere el uso del inmunógeno de proteína recombinante (aa 80-235) como control positivo o agente de bloqueo para confirmar la especificidad.
• Dado que el TNF-α se secreta en gran medida, la estimulación con LPS o PMA/ionomicina en presencia de un inhibidor del transporte de proteínas (p. ej., brefeldina A) puede mejorar la tinción intracelular en macrófagos o células T.
• Valide el anticuerpo en el sistema de muestra relevante (p. ej., esplenocitos de ratón o líneas celulares de macrófagos) e incluya los controles de isotipo apropiados.
• Proteja el conjugado de PE de la luz y evite los ciclos de congelación-descongelación para mantener la intensidad de la fluorescencia.

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