Anticuerpo Monoclonal de Rata anti-Mouse CD45R/B220 Conjugado con PE para Citometría de Flujo - P06800 / P08575

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD45R/B220

• CD45R/B220, codificado por el gen Ptprc, es una fosfatasa de proteínas tirosina de tipo receptor (PTPase), también conocida como antígeno común de leucocitos (L-CA) y antígeno de linfocitos 5 (Ly-5). Se expresa predominantemente en células hematopoyéticas, incluidos los linfocitos B y T, y existe en múltiples isoformas generadas por splicing alternativo.
• La proteína actúa como un regulador crítico de la señalización del receptor de células T mediante la modulación de la actividad de las quinasas de la familia Src, como LYN y FYN. Desfosforila LYN, influyendo en las cascadas de señalización descendentes esenciales para la activación y coactivación de las células T tras la unión a DPP4.
• En las sinapsis inmunológicas entre células presentadoras de antígenos (APC) y células T, CD45 interactúa con CLEC10A en células dendríticas inmaduras, lo que reconoce el CD45 portador de antígeno Tn en las células T efectoras. Esta interacción ayuda a ajustar los umbrales de activación de las células T y a limitar las respuestas autoinmunes (Por similitud).
• CD45 contiene dos dominios de fosfatasa intracelulares: el primer dominio exhibe actividad catalítica, mientras que el segundo dominio parece regular la especificidad del sustrato. La región extracelular está muy glicosilada y contribuye a las interacciones con los ligandos y a las funciones específicas de la isoforma.
• La proteína se localiza principalmente en la membrana plasmática y se enriquece en balsas de membrana y sinapsis inmunológicas, donde organiza espacialmente los complejos de señalización tras el compromiso antigénico.
• Como glicoproteína transmembrana y miembro de la familia de las fosfatasas de proteínas, CD45 es un marcador bien establecido de linajes de células inmunitarias. La isoforma B220 se asocia específicamente con las células B y se utiliza ampliamente para identificar poblaciones de células B en modelos de ratón.
• Las modificaciones postraduccionales, incluidas la fosforilación y la glicosilación, modulan la actividad enzimática de CD45 y su expresión en la superficie celular, influyendo así en la dinámica de la señalización de las células inmunitarias.
• Aunque se estudia principalmente en células linfoides, CD45 también desempeña funciones en otros subconjuntos de leucocitos, contribuyendo a las respuestas inmunitarias innatas y adaptativas integradas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético derivado de una región conservada del CD45R/B220 de ratón/humano. Se espera que el anticuerpo resultante reconozca el CD45R/B220 de ratón; la reactividad cruzada con ortólogos humanos debe validarse experimentalmente si es necesario.
• Este anticuerpo está conjugado con PE (ficoeritrina), un fluoróforo brillante adecuado para paneles de citometría de flujo multicolor. Considere titular el anticuerpo para optimizar la relación señal-ruido y minimizar la unión inespecífica en su sistema celular específico.
• Para aplicaciones de citometría de flujo, utilice colorantes de viabilidad adecuados y reactivos de bloqueo de receptores Fc para reducir la tinción de fondo. Analice tejidos linfoides de ratón frescos o criopreservados adecuadamente (bazo, ganglios linfáticos) para detectar poblaciones de células B positivas para B220.
• Dado el rango de peso molecular informado (130–144 kDa) que refleja el splicing alternativo y la glicosilación, confirme la expresión y el tamaño de la banda mediante western blot si adapta este producto para métodos de detección ortogonales, aunque la aplicación validada principal es la citometría de flujo.

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