Anticuerpo monoclonal PE/Cyanina7 anti-Ly-6A/E (Sca-1) de ratón para citometría de flujo - P05533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del antígeno linfocitario 6A-2/6E-1 (Sca-1)

• El antígeno linfocitario 6A-2/6E-1, conocido comúnmente como antígeno 1 de células madre (Sca-1) o proteína activadora de células T (TAP), está codificado por el gen Ly6a en ratones y pertenece a la superfamilia Ly-6/uPAR de proteínas ancladas por glicosilfosfatidilinositol (GPI).
• Sca-1 es un marcador bien establecido de células madre hematopoyéticas y células progenitoras murinas, y se expresa de forma generalizada en múltiples tejidos.
• La función principal de Sca-1 está ligada a la activación de células T, donde puede modular la señalización después de su interacción, contribuyendo a la regulación de la respuesta inmune.
• Sca-1 está anclado a la hoja externa de la membrana plasmática mediante un resto de GPI, no presenta dominio transmembrana ni citoplasmático, y depende de la asociación con balsas lipídicas para la transducción de señales.
• Como glicoproteína anclada por GPI, Sca-1 sufre modificaciones postraduccionales que incluyen glicosilación N-ligada y la adición del ancla GPI, que son fundamentales para su localización membranal y su función.
• La proteína contiene enlaces disulfuro conservados que estabilizan su plegamiento de tres dedos, característico de la familia Ly-6, facilitando las interacciones proteína-proteína.
• El peso molecular observado de Sca-1 suele superar su masa calculada (14,4 kDa) debido a una extensa glicosilación, y su detección típica se produce alrededor de 115 kDa en SDS-PAGE en condiciones reductoras.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó usando un inmunógeno recombinante que cubre el dominio extracelular (aminoácidos 27-111) de Sca-1 de ratón, dirigido a la conformación nativa para un reconocimiento superior en citometría de flujo.
• Para aplicaciones de citometría de flujo, se recomienda titular el anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima, e incluir controles de isotipo adecuados y pasos de bloqueo de receptores Fc para minimizar la unión inespecífica.
• Tenga en cuenta que el conjugado PE/Cianina7 es sensible a la luz y a los ciclos de congelación-descongelación; protéjalo siempre de la luz y evite congelaciones repetidas.
• Valide la especificidad del anticuerpo en la cepa de ratón o línea celular correspondiente, ya que existen variaciones alélicas (por ejemplo, Ly-6A.2 frente a Ly-6E.1); el inmunógeno corresponde al alelo Ly-6A.2.
• La expresión de Sca-1 puede aumentar después de la activación en células T; pueden ser necesarios experimentos de curso temporal para capturar los cambios dinámicos de expresión.

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