Anticuerpo monoclonal de conejo PE/Cyanina7 anti-CD33 humano para citometría de flujo - P20138

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD33

• CD33 (Siglec-3) es una lectina de tipo inmunoglobulina que se une al ácido siálico, que media las interacciones célula-célula y ayuda a mantener las células inmunes en estado de reposo. Referencias relacionadas: PMID:10611343, PMID:11320212, PMID:15597323
• Se une de forma preferente a glicanos con ácido siálico unidos alfa-2,3 y alfa-2,6 presentes en glicoproteínas y glicolípidos. Referencias relacionadas: PMID:7718872
• Tras la unión al ligando (por ejemplo, C1q o glicoproteínas sialiladas), los motivos ITIM citoplasmáticos son fosforilados por quinasas de tipo Src como LCK, creando sitios de acoplamiento para las fosfatasas PTPN6/SHP-1 y PTPN11/SHP-2. Referencias relacionadas: PMID:10887109, PMID:28325905, PMID:10206955, PMID:10556798
• Estas fosfatasas desfosforilan moléculas de señalización posteriores, generando efectos inhibitorios; una vía represora en monocitos requiere PI3K. Referencias relacionadas: PMID:10206955, PMID:10887109, PMID:15597323
• CD33 se localiza en la membrana celular y los peroxisomas, y se expresa principalmente en células del linaje monocítico/mieloide y microglía cerebral (el empalme alternativo genera múltiples isoformas).
• La proteína es una glicoproteína de membrana de tipo I de paso único, con un dominio extracelular de tipo V similar a la inmunoglobulina y varios motivos ITIM intracelulares, y se modifica mediante enlaces disulfuro y fosforilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 18–259, que incluye el dominio extracelular de unión al ácido siálico, por lo que es probable que el anticuerpo reconozca CD33 nativo en la superficie celular, lo que lo hace ideal para citometría de flujo (FC).
• Para obtener una tinción FC óptima, titule el anticuerpo en el sistema de células mieloides/monocíticas humanas correspondiente para determinar la dilución de trabajo adecuada.
• Incluya controles de isotipo y colorantes de viabilidad adecuados en su panel de FC y proteja el anticuerpo conjugado con PE/Cianina7 de la luz, ya que el fluoróforo es fotosensible.

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