Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD8a de ratón conjugado con PE/Cyanine7 para FC - P01731

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD8a

• CD8a (cadena alfa de la glucoproteína CD8 de superficie de las células T), también conocida como Lyt-2, es una glucoproteína integral de membrana esencial para la inmunidad adaptativa.
• Funciona como correceptor de las moléculas del MHC de clase I en las células presentadoras de antígenos, permitiendo que las células T CD8+ reconozcan los complejos péptido-MHC I e inicien respuestas citotóxicas contra células infectadas o tumorales.
• Tras la activación del TCR, CD8a recluta la tirosina cinasa Src LCK al complejo TCR-CD3, desencadenando cascadas de fosforilación que conducen a la producción de linfocinas, la adhesión y la activación de CTL.
• En las células NK, los homodímeros de CD8a favorecen la supervivencia y la eliminación secuencial de las células diana al facilitar la conjugación y la lisis.
• La señalización de CD8a promueve la diferenciación de los linfocitos activados en células T CD8+ de memoria, manteniendo la inmunidad a largo plazo.
• La proteína se localiza exclusivamente en la membrana celular como proteína de membrana de tipo I de un solo paso, con un dominio extracelular de inmunoglobulina, una hélice transmembrana y una cola citoplasmática corta.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la formación de enlaces disulfuro, la glucosilación ligada a N y la palmitoilación, que pueden influir en la organización de la membrana y la señalización.
• El corte y empalme alternativo produce múltiples isoformas, aunque la isoforma de longitud completa predomina en las células T.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio extracelular (aminoácidos 28–196) de CD8a de ratón, evitando las regiones transmembrana y citoplasmática; se espera que este diseño produzca anticuerpos que reconozcan la conformación nativa de la superficie celular.
• Este conjugado de PE/Cyanine7 está validado para citometría de flujo; asegúrese de realizar una titulación adecuada (por ejemplo, 0,25–1 µg por 10^6 células) e incluya controles de isotipo al analizar linfocitos de ratón.
• Dado que CD8a se coexpresa con el TCR, considere la tinción conjunta con anti-CD3 para distinguir las células T CD8+ de las células NK, que también pueden expresar homodímeros de CD8a.
• Valide la especificidad en cepas de ratón deficientes en CD8a o mediante el bloqueo con anti-CD8a no conjugado para confirmar la unión.
• Evite la exposición prolongada a la luz para preservar la estabilidad del fluoróforo; utilícelo dentro de las 24 horas posteriores a la reconstitución si se diluye.

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