Anticuerpo Monoclonal de Conejo PER2 (Humano) para WB, ELISA, ChIP - O15055

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PER2

• PER2 (homólogo de proteína circadiana Period 2), también conocido como proteína del reloj circadiano PERIOD 2, es un componente central del reloj circadiano molecular. Funciona como un represor transcripcional dentro del bucle de retroalimentación de transcripción/traducción (TTFL) que impulsa ritmos de aproximadamente 24 horas en la expresión génica.
• Junto con PER1, CRY1 y CRY2, PER2 forma la rama negativa del TTFL. Interactúa directamente con heterodímeros CLOCK-BMAL1 en promotores de caja E para inhibir su propia expresión, mientras que las modificaciones postraduccionales (p. ej., fosforilación, acetilación, ubiquitinación) ajustan finamente el período (tau) de los ritmos circadianos.
• PER2 contribuye a la represión controlada por el reloj a través de múltiples modos: recluta complejos de remodelación de cromatina SIN3-HDAC y metiltransferasas H3K9 (SUV39H1/2) a los promotores de genes del reloj, y también interactúa con proteínas de unión a ARN y helicasas en sitios de terminación 3′ para modular la terminación de la transcripción.
• La proteína está implicada en la regulación metabólica y cardiovascular. Actúa como coactivador de PPARA y correpresor de NR1D1, uniéndose rítmicamente a los promotores de genes como BMAL1 y G6PC1, y reprime la adipogénesis mediada por PPARG. PER2 también regula la producción de óxido nítrico y prostaglandinas en aortas y controla la captación de glutamato a través de la expresión de VGLUT1.
• Las mutaciones bialélicas de pérdida de función en PER2 causan el síndrome familiar de fase de sueño avanzado (FASPS), lo que subraya su papel esencial en el ajuste del reloj circadiano a los ciclos de luz-oscuridad ambientales.
• PER2 se localiza principalmente en el núcleo, pero también se encuentra en el citoplasma, la región perinuclear y el nucléolo, reflejando un transporte dinámico y funciones específicas de cada compartimento.
• La proteína se expresa ampliamente, con niveles altos en el músculo esquelético y el páncreas, y niveles más bajos en el pulmón. La isoforma 2 se detecta específicamente en queratinocitos.
• Las características estructurales clave incluyen dos dominios PAS y un dominio de localización citoplasmática en el extremo C-terminal que contribuyen a las interacciones proteína-proteína y el tráfico subcelular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 1–100 del PER2 humano (O15055), una región N-terminal bien conservada y que probablemente genera anticuerpos que reconocen tanto isoformas de longitud completa como truncadas.
• Para la transferencia Western (Western blotting, WB), espere una banda a aproximadamente 137 kDa; use lisados nucleares o de células enteras de tejidos o líneas celulares humanas que se sabe que expresan PER2 (p. ej., músculo esquelético, páncreas). Los niveles endógenos de PER2 oscilan durante el ciclo circadiano; considere recolectar muestras en tiempos de zeitgeber definidos.
• Para aplicaciones de ELISA, el acoplamiento del anticuerpo con un reactivo de detección que apunte a un epítopo que no se superponga puede mejorar la sensibilidad y especificidad; valide el rango dinámico usando proteína PER2 recombinante o lisados celulares controlados.
• En la inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), el anticuerpo puede enriquecer regiones promotoras que contienen caja E de genes controlados por el reloj (p. ej., PER1, CRY1). Incluya regiones de control negativo apropiadas y confirme el enriquecimiento mediante qPCR bajo condiciones de reloj sincronizadas.
• Dado el papel de las modificaciones postraduccionales en la función de PER2, considere usar inhibidores de fosfatasas o condiciones desnaturalizantes si está estudiando interacciones o localizaciones dependientes de la fosforilación.

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