Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD94 humano conjugado con PerCP/Cyanine5.5 para citometría de flujo - Q13241

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD94

• CD94 (KLRD1) es un receptor transmembrana similar a una lectina de tipo C que forma heterodímeros unidos por puentes disulfuro con NKG2A (KLRC1) o NKG2C (KLRC2). Estos complejos reconocen la molécula no clásica del MHC de clase I HLA-E cuando presenta péptidos propios, lo que permite a las células inmunitarias monitorizar la expresión del MHC de clase I. Referencias relacionadas: PMID:10023772, PMID:18064301, PMID:18083576, PMID:12387742, PMID:9430220

• El heterodímero KLRD1-KLRC1 actúa como receptor inhibidor. En las células NK, recluta tirosina fosfatasas mediante motivos ITIM para atenuar las señales de activación. En las células T CD8+, contrarresta la señalización del TCR y promueve el agotamiento en microambientes tumorales ricos en HLA-E. Referencias relacionadas: PMID:30860984, PMID:9430220, PMID:9485206, PMID:12387742, PMID:18064301, PMID:30503213, PMID:12165520

• Por el contrario, el heterodímero KLRD1-KLRC2 actúa como receptor activador. Reconoce HLA-E cuando presenta péptidos derivados de HLA-G y media las respuestas adaptativas de las células NK frente a infecciones virales y la tolerancia materno-fetal. La señalización se produce a través del adaptador DAP12, lo que conduce a la fosforilación y activación celular. Referencias relacionadas: PMID:15940674, PMID:9655483, PMID:30134159, PMID:9754572, PMID:20952657, PMID:21825173

• CD94 se expresa en la membrana plasmática de las células NK, las células T αβ CD8+ de memoria/efectoras, las células T γδ y ciertos linfocitos T citotóxicos específicos de tumores. El patrón de expresión de los complejos receptores inhibidores frente a los activadores varía entre los diferentes subconjuntos de linfocitos.

• Durante la infección por SARS-CoV-2, el péptido de la proteína espicular viral puede ser presentado por HLA-E e interactuar con KLRD1-KLRC1, lo que provoca el agotamiento funcional de las células NK citotóxicas y de las células T CD8+, deteriorando así la vigilancia inmunitaria antiviral. Referencias relacionadas: PMID:32859121

• CD94 es una glucoproteína transmembrana con una orientación de tipo II de paso único (anclaje de señal), contiene un dominio similar a una lectina de tipo C y presenta un puente disulfuro. El corte y empalme alternativo produce múltiples isoformas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 32-179 de CD94 humano, que representan el dominio extracelular similar a una lectina de tipo C. El diseño de este dominio sugiere que el anticuerpo puede reconocer CD94 nativo plegado en la superficie celular, lo que lo hace adecuado para aplicaciones de citometría de flujo.
• Para la citometría de flujo, titule el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo de muestra. Incluya controles de isotipo adecuados y considere utilizar un bloqueo de los receptores Fc para reducir la unión inespecífica.
• Dado que el anticuerpo está conjugado directamente con PerCP/Cyanine5.5, está listo para su uso en paneles multicolor. Verifique la compatibilidad con la configuración de láseres y filtros de su instrumento y realice los ajustes de compensación necesarios.
• Se ha informado que el anticuerpo presenta reactividad cruzada con CD94 humano. Valide el ensayo en líneas celulares humanas pertinentes o en poblaciones primarias de células NK/T para confirmar la reactividad en su sistema experimental específico.

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