Anticuerpo Monoclonal de Conejo anti-Humano/Mono PD-1/CD279 conjugado con PerCP/Cianina5.5 para Citometría de Flujo - Q15116

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del PD-1

• La proteína 1 de muerte celular programada (PD-1, CD279) es un receptor inhibidor expresado en células T activadas por antígenos que desempeña un papel fundamental en la inducción y mantenimiento de la tolerancia inmunitaria propia. Referencias relacionadas: PMID:21276005 PMID:31754127 PMID:32184441

• El PD-1 transmite señales inhibitorias al unirse a sus ligandos PD-L1 (CD274) y PD-L2 (CD273), lo que conduce a la atenuación de la señalización del receptor de células T (TCR) y la supresión de la activación de las células T. Referencias relacionadas: PMID:21276005 PMID:26602187

• Tras la unión del ligando, el PD-1 se fosforila dentro de su motivo ITSM, reclutando la fosfatasa de tirosina SHP-2 (PTPN11), que desfosforila moléculas clave de señalización del TCR proximales como ZAP70, PKCθ y CD3ζ, inhibiendo así directamente la activación de las células T. Referencias relacionadas: PMID:32184441

• Los tumores explotan el eje inhibidor PD-1/PD-L1 para evadir la vigilancia inmunitaria; la interacción con PD-L1 en las células tumorales inhibe las funciones efectoras de los linfocitos T citotóxicos (CTL), promoviendo la evasión inmunitaria. Referencias relacionadas: PMID:28951311

• El bloqueo de la vía del PD-1 invierte el agotamiento de las células T, restaura la inmunidad antitumoral y proporciona la base mecanicista para la terapia con inhibidores de puntos de control inmunitario en oncología. Referencias relacionadas: PMID:22658127 PMID:25034862 PMID:25399552

• El PD-1 es una glucoproteína transmembrana de tipo I ubicada en la membrana celular, perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas.

• La proteína sufre modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, glicosilación N-ligada y ubiquitinación, que modulan su expresión y actividad de señalización.

• Su cola intracelular contiene un motivo ITSM esencial para el reclutamiento de SHP-2, mientras que la región extracelular comprende un dominio tipo V de inmunoglobulina responsable de la interacción con el ligando.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para citometría de flujo, titre el anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima para su tipo de célula y condiciones experimentales. Incluya los controles de isotipo apropiados y reactivos de bloqueo de receptores Fc para minimizar la unión inespecífica.
• Valide la expresión de PD-1 en células T humanas activadas o células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de mono cinomolgus como sistema de control positivo.
• Use células aisladas frescas cuando sea posible y evite la estimulación prolongada que puede reducir la expresión de PD-1 para garantizar una tinción confiable.
• Prepare suspensiones de células únicas y filtre antes de la adquisición para evitar obstrucciones y garantizar datos de alta calidad. Realice la exclusión de células muertas para mejorar la especificidad.
• Para paneles multicolores, confirme la compatibilidad del fluorocromo y la configuración de compensación, ya que PerCP/Cianina5.5 tiene superposición espectral con otros tintes rojos.

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