Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD4 de ratón conjugado con PerCP/Cyanine5.5 para citometría de flujo - P06332

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de CD4

• La diana es CD4 de ratón (glucoproteína de superficie de células T CD4), también conocida como L3T4 o Ly-4. Se han descrito dos isoformas generadas por corte y empalme alternativo, siendo la isoforma 1 la secuencia canónica (UniProt P06332).
• CD4 es una glucoproteína integral de membrana que funciona como correceptor de las moléculas del MHC de clase II en las células T, reconoce péptidos derivados de proteínas extracelulares y desempeña así un papel esencial en la inmunidad adaptativa.
• Tras interactuar con los complejos MHC de clase II:péptido en las células presentadoras de antígenos, CD4 interactúa simultáneamente con el receptor de células T (TCR) y recluta la tirosina cinasa Src LCK al complejo TCR-CD3, iniciando cascadas de señalización que promueven la activación de las células T colaboradoras, la producción de citocinas y la proliferación.
• Además de la señalización dependiente del TCR, CD4 también contribuye a funciones independientes de TCR/LCK en macrófagos y células NK, influyendo en la diferenciación, activación, expresión de citocinas y migración celular.
• CD4 es fundamental para el desarrollo de las células T colaboradoras en el timo y puede desencadenar la diferenciación de monocitos en macrófagos maduros funcionales.
• La proteína se expresa predominantemente en la membrana celular de las células T colaboradoras, especializadas en activar células T citotóxicas, regular las células B y activar los fagocitos. También se encuentra en otras células inmunitarias, como macrófagos, células dendríticas y células NK.
• Entre las principales modificaciones postraduccionales se incluyen la glucosilación ligada a N, la palmitoilación, la fosforilación y la presencia de enlaces disulfuro, importantes para su estabilidad estructural y función.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo abarca los aminoácidos 27–394 de CD4 de ratón (NP_038516.1), cubriendo todo el dominio extracelular. Este diseño favorece el reconocimiento de CD4 nativo expresado en la superficie celular.
• Este anticuerpo está validado para citometría de flujo (FC) y se suministra como conjugado con PerCP/Cyanine5.5, lo que permite la detección directa de CD4 de ratón en células vivas sin necesidad de un anticuerpo secundario.
• Al configurar experimentos de citometría de flujo, considere titular el anticuerpo para determinar la concentración de tinción óptima para su tipo celular e instrumento específicos. Incluya controles de isotipo adecuados y colorantes de viabilidad para garantizar una estrategia de compuertas precisa.
• Dado que CD4 se expresa en células T colaboradoras y otras poblaciones inmunitarias, verifique el patrón de tinción en el tejido o las muestras celulares de ratón pertinentes (por ejemplo, esplenocitos, timocitos y PBMC) y considere la tinción conjunta con CD3 y CD8 para diferenciar los subtipos de células T.

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