Anticuerpo Policlonal PERK Conejo para IF/ICC, ELISA - Q9NZJ5

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PERK

• Identidad de la proteína e isoformas: PERK (EIF2AK3) también se conoce como quinasa similar a PRKR del retículo endoplásmico, quinasa eIF2-alfa pancreática y proteína tirosina quinasa EIF2AK3. Pertenece a la familia de quinasas eIF2α y es el sensor principal del estrés del RE.
• Quinasa de la respuesta a proteínas mal plegadas (UPR): PERK es una quinasa que detecta el estrés metabólico y fosforila la subunidad α del factor de iniciación de la traducción eucariota 2 (EIF2S1/eIF-2α) en respuesta a proteínas mal plegadas y varios estreses celulares.
  Referencias relacionadas:
  PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:11907036
• Activación por proteínas mal plegadas: Reconoce y se une específicamente a proteínas mal plegadas en el RE, lo que desencadena su autofosforilación y activación, iniciando la respuesta integrada al estrés (ISR).
  Referencias relacionadas:
  PMID:10677345, PMID:27917829, PMID:31023583
• Reprogramación de la traducción: La fosforilación de eIF2α atenúa la síntesis de proteínas global dependiente de capa, mientras promueve selectivamente la traducción de ARNm sensibles al estrés, incluidos los factores de transcripción ATF4 y QRICH1, reprogramando así la expresión génica.
  Referencias relacionadas:
  PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:31023583
• Regulación mitocondrial: La señalización de la UPR mediada por PERK aumenta la fosforilación oxidativa mitocondrial al regular al alza la expresión de COX7A2L a través de ATF4. En los sitios de contacto mitocondria-RE, ATAD3A inhibe a PERK para proteger a las mitocondrias de una UPR excesiva.
  Referencias relacionadas:
  PMID:31023583, PMID:39116259
• Activación de NRF2: Además de eIF2α, PERK fosforila a NFE2L2/NRF2, causando su disociación de KEAP1 y su posterior translocación nuclear, lo que activa genes antioxidantes y de desintoxicación (Por similitud).
• Localización subcelular: Membrana del retículo endoplásmico – PERK es una proteína transmembrana que reside predominantemente en el RE.
• Distribución tisular: Expresada de forma ubicua, con niveles particularmente altos en tejidos secretores, consistente con su papel en la monitorización del ambiente de plegamiento del RE.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a una región dentro de los aminoácidos 50–600 de PERK humano. Para IF/ICC, se recomiendan condiciones estándar de permeabilización y fijación adecuadas para proteínas residentes en el RE. Realice una titulación del anticuerpo primario para optimizar la relación señal-ruido.
• Al usar para ELISA, considere incluir un péptido bloqueador o la proteína PERK recombinante como control de especificidad. Valide la reactividad cruzada con muestras de ratón utilizando lisados de tejidos con alta actividad secretora.
• Dado que PERK es una quinasa transmembrana del RE, considere usar detergentes suaves durante la extracción de proteínas para preservar epítopos conformacionales si el anticuerpo se aplica en otros inmunoensayos más allá de las aplicaciones validadas.

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