Anticuerpo monoclonal de conejo contra PFKFB3 para WB, IHC-P, ELISA - Q16875

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de PFKFB3

• PFKFB3 (6-fosfofructo-2-quinasa/fructosa-2,6-bisfosfatasa 3) es una enzima bifuncional que cataliza tanto la síntesis como la degradación de la fructosa-2,6-bisfosfato, un potente regulador alostérico de la glucólisis.
• También se conoce como antígeno de carcinoma renal NY-REN-56 y fosfofructoquinasa-2 inducible (iPFK-2).
• PFKFB3 pertenece a la familia de fosfofructoquinasa-2/fructosa-2,6-bisfosfatasa, que incluye cuatro isoenzimas (PFKFB1-4) con expresión específica de tejido; PFKFB3 se expresa de forma ubicua.
• Al controlar la concentración intracelular de fructosa-2,6-bisfosfato, PFKFB3 cumple un papel fundamental en la regulación del flujo glucolítico y el metabolismo energético.
• La enzima está sujeta a splicing alternativo, generando múltiples isoformas (palabra clave UniProt: Splicing alternativo).
• PFKFB3 posee actividad tanto de quinasa (transferasa) como de bisfosfatasa (hidrolasa), por lo que se clasifica como una enzima multifuncional.
• Su regulación se produce a través de la fosforilación (palabra clave UniProt: Fosfoproteína); otras palabras clave incluyen estructura 3D, unión a ATP, unión a nucleótidos y proteoma de referencia.

Guía experimental y consejos técnicos

• Los aminoácidos 400-500 del inmunógeno se encuentran en la región C-terminal, que puede estar conservada entre especies, lo que respalda la reactividad cruzada reportada con humano y ratón.
• Para WB, se espera una banda específica de aproximadamente 60 kDa; valide en sistemas de muestra relevantes (humano, ratón) usando controles de carga adecuados.
• Para IHC-P, puede ser necesaria la recuperación de antígeno; considere la recuperación inducida por calor en tampón de citrato (pH 6,0) o tampón EDTA (pH 9,0).
• Al ser un anticuerpo monoclonal, ofrece alta especificidad; incluya siempre controles negativos y positivos en los experimentos.
• Las aplicaciones de ELISA requieren la optimización de la concentración del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo para obtener una relación señal-ruido óptima.

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