Phospho-ACC1/ACC2-S79 Rabbit PolymAb® para WB, IF/ICC, ELISA - Q13085 / O00763

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la acetil-CoA carboxilasa 1/2

• ACC1 (acetil-CoA carboxilasa 1, codificada por ACACA) es una enzima multifuncional dependiente de biotina que cataliza la carboxilación dependiente de ATP de acetil-CoA a malonil-CoA, el primer paso y limitante de la velocidad de la biosíntesis de novo de ácidos grasos. Referencias relacionadas: PMID:20457939 PMID:20952656 PMID:29899443
• ACC2 (acetil-CoA carboxilasa 2, codificada por ACACB) es una isoforma homóloga que regula principalmente la oxidación de los ácidos grasos; el anticuerpo reconoce un sitio de fosforilación conservado común a ACC1 y ACC2.
• La enzima se localiza predominantemente en el citoplasma / citosol.
• ACC1 se expresa en cerebro, placenta, músculo esquelético, tejido renal, pancreático y adiposo; está presente a niveles bajos en el pulmón y no se detecta en el hígado.
• Como una fosfoproteína, su actividad se modula mediante la fosforilación en residuos clave como Ser79 (numeración de ACC1), vinculando el estado de energía celular con el metabolismo de los lípidos.
• La proteína requiere biotina como cofactor y une ATP, Mg²⁺ o Mn²⁺; posee un dominio portador de carboxilasa de biotina esencial para su función.
• Las modificaciones post-traduccionales adicionales incluyen la acetilación, y la enzima está sujeta a regulación alostérica.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético que corresponde a los residuos alrededor de Ser79; por lo tanto, se deben incluir inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra para preservar la señal de fosforilación.
• Para la transferencia Western (Western blotting), tenga en cuenta el alto peso molecular predicho (~265kDa); considere el uso de geles SDS-PAGE de bajo porcentaje, tiempos de transferencia extendidos y marcadores de peso molecular apropiados.
• En IF/ICC, pueden ser necesarias condiciones de fijación y permeabilización optimizadas para lograr una tinción citoplasmática robusta.
• Al realizar ELISA, verifique la especificidad fosfo-específica comparando la unión a péptidos fosforilados frente a no fosforilados o después del tratamiento con fosfatasa de las muestras.

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