Anticuerpo Monoclonal de Conejo Phospho-Akt (S473) para WB, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de AKT (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 es una proteína quinasa de serina/treonina y una de las tres isoformas de AKT (AKT1, AKT2, AKT3) que median la señalización aguas abajo de PI3K, regulando el metabolismo, la proliferación, la supervivencia celular, el crecimiento y la angiogénesis. Referencias relacionadas: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• Fosforila GSK3 para regular la síntesis de glucógeno y la proliferación celular, y promueve la captación de glucosa mediando la translocación inducida por insulina del transportador de glucosa GLUT4.
• AKT1 promueve la supervivencia celular fosforilando factores proapoptóticos, incluyendo MAP3K5 (quinasa relacionada con la señal de apoptosis), inhibiendo así la apoptosis inducida por estrés oxidativo. Referencias relacionadas: PMID:11154276
• A través de la fosforilación de TSC2 en Ser-939 y Thr-1462, AKT activa la vía mTORC1, mejorando la síntesis de proteínas y el crecimiento celular. Referencias relacionadas: PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT regula los factores de transcripción FOXO fosforilando FOXO1, FOXO3 y FOXO4, lo que conduce a su retención citoplasmática e inhibición de la expresión de genes proapoptóticos. Referencias relacionadas: PMID:10358075
• Modula la transcripción dependiente de NF-kappa-B y fosforila CREB1, induciendo la expresión de genes prosupervivencia como BCL2 y MCL1. Referencias relacionadas: PMID:9829964
• AKT1 se localiza en el citoplasma, el núcleo, la membrana celular y el espacio intermembranoso mitocondrial, reflejando sus diversos roles funcionales.
• La proteína se expiende ampliamente en los tipos de células humanas, con una expresión y fosforilación aumentadas observadas durante la progresión del cáncer de próstata y de mama.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se genera contra un péptido fosforilado correspondiente a Ser473 de AKT1 humana; puede reconocer el sitio de fosforilación equivalente en AKT2 y AKT3 debido a la conservación de la secuencia.
• Para Western blot, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y considere usar un control tratado con fosfatasa para confirmar la especificidad fosfo-específica.
• Pesos moleculares predichos: 48–55 kDa para diferentes isoformas de AKT; el bloqueo con el fosfopéptido inmunizante puede ayudar a verificar la identidad de la banda.
• Para ELISA, optimice la concentración del antígeno de recubrimiento y considere el uso de anticuerpos fosfo-específicos y totales emparejados para la normalización.
• Valide el rendimiento en el sistema de muestra relevante y las condiciones de tratamiento (p. ej., estimulación con factores de crecimiento o tratamientos con inhibidores) antes del uso a gran escala.

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