Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-AKT1S1/PRAS40-T246 para WB y ELISA - Q96B36

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de AKT1S1/PRAS40

• El sustrato 1 de AKT1 rico en prolina (AKT1S1), también conocido comúnmente como PRAS40 (sustrato de AKT rico en prolina de 40 kDa), está codificado por el gen AKT1S1 en humanos.
• AKT1S1 actúa como un regulador negativo clave del objetivo mecánico del complejo 1 de rapamicina (mTORC1), un sensor de nutrientes central que promueve el crecimiento celular y la acumulación de biomasa. Inhibe directamente la actividad de mTORC1 al bloquear el sitio de reclutamiento de sustratos de la quinasa MTOR. Referencias relacionadas: PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057, PMID:29236692
• En respuesta a la insulina y los nutrientes, AKT1S1 se disocia de mTORC1, aliviando la inhibición y permitiendo que la señalización de mTORC1 proceda, un proceso estrechamente ligado a su estado de fosforilación y asociación con proteínas 14-3-3. Referencias relacionadas: PMID:17386266, PMID:18372248, PMID:16174443
• Localizado predominantemente en el citoplasma y el citosol, AKT1S1 se expresa ampliamente en todos los tejidos, con los niveles más altos observados en el hígado y el corazón. Destaca que su expresión suele estar elevada en líneas celulares de cáncer como A-549 y HeLa en comparación con líneas celulares normales.
• La proteína sufre múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación en varios residuos y metilación, y está sujeta a splicing alternativo, lo que contribuye a su regulación funcional.
• Más allá de la señalización metabólica, AKT1S1 también puede desempeñar un papel en la neuroprotección mediada por el factor de crecimiento nervioso, aunque esta función se infiere principalmente por similitud con otras especies.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó utilizando un fosfopéptido sintético correspondiente al sitio de fosforilación Thr246. Para mantener la detección fosfoespecífica, se recomienda utilizar inhibidores de fosfatasas durante los pasos de lisis de células/tejidos e inmunoprecipitación.
• Para la transferencia Western (WB), se espera una banda de proteína de aproximadamente 27 kDa según el peso molecular calculado de AKT1S1.
• Al realizar ELISA, un bloqueo de péptido adecuado y controles de péptido fosforilado/no fosforilado pueden ayudar a confirmar la especificidad por la forma fosforilada en T246.
• Dada la expresión ubicua y la fosforilación condicional de AKT1S1, se recomienda validar el rendimiento del anticuerpo en el sistema de muestra correspondiente (por ejemplo, células estimuladas con insulina frente a células en ayunas).

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