Fosfo-AKT1S1/PRAS40-T246 pAb de conejo para WB, ELISA - Q96B36

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de AKT1S1/PRAS40

• AKT1S1 (también conocido como PRAS40, sustrato rico en prolina de AKT de 40 kDa) es un regulador negativo del objetivo mecanístico de la rapamicina complejo 1 (mTORC1), un sensor central de nutrientes conservado evolutivamente que estimula reacciones anabólicas y la biosíntesis de macromoléculas para promover la generación de biomasa y el crecimiento celular. Referencias relacionadas: PMID:17277771 | PMID:17386266 | PMID:17510057
• En ausencia de insulina y nutrientes, AKT1S1 se asocia con el complejo mTORC1 e inhibe directamente la actividad de mTORC1 bloqueando el sitio de reclutamiento de sustratos de MTOR. Referencias relacionadas: PMID:29236692
• En respuesta a la insulina y los nutrientes, AKT1S1 se disocia de mTORC1, un proceso que depende de su estado de fosforilación y su unión a proteínas 14-3-3. Referencias relacionadas: PMID:17386266 | PMID:18372248 | PMID:16174443
• La fosforilación en Thr246 (el sitio del inmunógeno) promueve la unión a 14-3-3 y alivia la inhibición de mTORC1.
• AKT1S1 se localiza predominantemente en el citoplasma y el citosol.
• Se expiende ampliamente con los niveles más altos en hígado y corazón; la expresión está elevada en algunas líneas celulares cancerosas (p. ej., A-549, HeLa) en comparación con las células normales (p. ej., HEK293).
• También puede desempeñar un papel en la neuroprotección mediada por el factor de crecimiento nervioso (Por similitud).
• Clasificado como una fosfoproteína con un peso molecular calculado de aproximadamente 27 kDa (UniProt: 27383 Da); sufre empalme alternativo.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo detecta específicamente la forma fosforilada Thr246 de AKT1S1; no reconoce la proteína no fosforilada. Incluya lisados tratados con fosfatasa como control negativo para confirmar la señal dependiente de la fosforilación.
• Para la transferencia Western (Western blotting), espere una banda cerca de 27 kDa. Use inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar los estados de fosforilación.
• En aplicaciones de ELISA, considere recubrir con el péptido fosforilado inmunógeno y valide la especificidad frente al péptido correspondiente no fosforilado.
• Al estudiar la señalización mTORC1, estimule las células con insulina o factores de crecimiento para inducir la fosforilación de AKT1S1 y monitorear la disociación del complejo mTORC1.
• Valide el anticuerpo en su sistema experimental; las líneas celulares de cáncer humano (p. ej., HeLa, A-549) pueden exhibir una mayor expresión endógena, lo que facilita la detección.

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