Anticuerpo policlonal de conejo contra Phospho-AMPKa1-T183/AMPKa2-T172 para WB, ELISA - Q13131 / P54646

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de AMPKα1/AMPKα2

• La subunidad alfa-1 catalítica de la proteína quinasa activada por 5'-AMP (AMPKα1, codificada por PRKAA1) funciona como el principal sensor de energía en las células eucariotas, fosforilando una amplia gama de sustratos para orquestar la adaptación metabólica. Referencias relacionadas: PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• Inhibe las vías anabólicas, incluidas la biosíntesis de proteínas, carbohidratos y lípidos, mientras promueve procesos catabólicos como la oxidación de ácidos grasos y la captación de glucosa, en parte mediante la fosforilación directa de enzimas metabólicas como ACACA y HMGCR.
• AMPKα1 también regula la expresión génica mediante la fosforilación de reguladores de la transcripción (p. ej., CRTC2, FOXO3, SREBF1), lo que afecta la gluconeogénesis, el metabolismo de los lípidos y las respuestas al estrés. Referencias relacionadas: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Más allá del metabolismo, AMPKα1 controla el crecimiento celular y la autofagia a través de la inhibición de mTORC1 (fosforilando RPTOR, TSC2, FNIP1) y la activación de ULK1, asegurando la supervivencia bajo estrés nutricional. Referencias relacionadas: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666
• Ubicada en el citoplasma, el núcleo y los endosomas tardíos, AMPKα1 se desplaza dinámicamente para fosforilar objetivos en múltiples compartimentos, vinculando la localización subcelular con la especificidad funcional.
• AMPKα1 es una serina/treonina quinasa y fosfoproteína, cuya actividad está estrictamente controlada por la fosforilación, particularmente en los residuos dentro del bucle de activación; también experimenta ubiquitinación y acetilación.
• El empalme alternativo produce múltiples isoformas, lo que potencialmente contribuye a la regulación específica del tejido y a resultados de señalización distintos.
• La AMPKα2 (PRKAA2, SWISS P54646), estrechamente relacionada, comparte una alta homología y también es detectada por este anticuerpo, lo que permite un análisis combinado de ambas subunidades catalíticas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético que corresponde a los residuos alrededor de Thr183 de PRKAA1 humano. Este anticuerpo es adecuado para detectar niveles endógenos de AMPKα1 y AMPKα2 fosforiladas en Western blotting, con bandas esperadas alrededor de 64 kDa (AMPKα1) y 62–65 kDa (AMPKα2).
• Para Western blotting, considere utilizar tampones de lisis específicos para fosforilación suplementados con inhibidores de fosfatasa para preservar el fosfo-epítopo y optimizar la intensidad de la señal.
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede funcionar como reactivo de captura o de detección; incluya controles de péptidos fosforilados y valide el rendimiento frente a contrapartes no fosforiladas para garantizar la especificidad.
• Se espera reactividad cruzada con muestras de ratón y rata debido a la alta conservación de la secuencia alrededor de los sitios de fosforilación, pero verifique siempre la detección en su matriz de muestra específica y condiciones experimentales.

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