Fosfo-APP-T668 pAb de conejo para WB y ELISA - P05067

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la proteína precursora del péptido amiloide-beta

• La proteína precursora del péptido amiloide-beta (APP) es una glicoproteína transmembrana de tipo I que existe en varias isoformas, con APP695 predominando en las neuronas y APP751/APP770 en células no neuronales. También se conoce como ABPP, APPI y péptido amiloide vascular cerebral.
• La APP funciona como un receptor de superficie celular implicado en el crecimiento de las neuritas, la adhesión neuronal y la axogénesis. La interacción entre las moléculas de APP en células vecinas promueve la sinaptogénesis. Referencias relacionadas: PMID:25122912
• La APP actúa como un receptor de membrana de la quinesina I, mediando el transporte anterógrado axonal de la beta-secretasa y la presenilina 1, y desempeña un papel en el transporte de carga hacia las sinapsis. Referencias relacionadas: PMID:17062754 PMID:23011729
• La APP sufre procesamiento proteolítico para generar péptidos amiloide-beta, que son quelantes de metales lipofílicos que se unen al cobre, zinc y hierro. Estos péptidos promueven la agregación y fosforilación de tau y pueden inducir estrés oxidativo y neurotoxicidad.
• Subcelularmente, la APP se localiza en la membrana celular, el pericarion, los conos de crecimiento, las fosas revestidas de clatrina, los endosomas tempranos y también se secreta. Se puede encontrar en la superficie celular, el núcleo y el citoplasma bajo ciertas condiciones.
• Especificidad de tejido: La APP se expresa altamente en el cerebro y el líquido cefalorraquídeo, con los niveles más altos en la corteza frontal. También se expresa en el riñón, el corazón y el bazo. La isoforma APP695 es neuronal, mientras que APP751 es abundante en los linfocitos T.
• La fosforilación en Thr668 (T668) es una modificación regulatoria clave de la APP. Este anticuerpo reconoce específicamente la forma fosforilada, permitiendo el estudio de la señalización y el procesamiento dependientes de la fosforilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos que rodean la Thr668 de la APP humana. Es adecuado para detectar los niveles endógenos de APP solo cuando está fosforilada en T668.
• Para Western blot, un rango de dilución inicial de 1:500–1:2000 es típico para anticuerpos policlonales; optimice según su muestra y sistema de detección. Valide la especificidad tratando los lisados celulares con fosfatasa lambda.
• El peso molecular predicho de la APP de longitud completa es de ~87 kDa, pero las modificaciones postraduccionales y el procesamiento proteolítico pueden producir múltiples bandas. Incluya marcadores de peso molecular apropiados.
• Para ELISA, úselo como anticuerpo de captura o detección según su formato de ensayo; puede ser necesario emparejarlo con otro anticuerpo APP para ELISA sándwich.
• Se ha informado reactividad cruzada con ratón y rata; verifique en su tejido objetivo para confirmar la reactividad cruzada y la especificidad.
• Considere el uso de muestras frescas o almacenadas correctamente, y evite ciclos repetidos de congelación-descongelación para preservar el estado de fosforilación.

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