Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-ATM-S1981 para WB, IF-P, ELISA - Q13315

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ATM

• ATM es una proteína quinasa de serina/treonina que actúa como sensor primario del daño del ADN, reconoce roturas de doble cadena y activa vías de señalización de puntos de control, apoptosis y reparación del ADN. Referencias relacionadas: PMID:10550055 PMID:10839545 PMID:10910365
• Reconoce la secuencia consenso de sustrato [ST]-Q y fosforila numerosos objetivos críticos, incluidos H2AX (Ser139), CHEK2, p53, BRCA1 y múltiples proteínas de reparación del ADN, coordinando así la detención del ciclo celular y la respuesta al daño. Referencias relacionadas: PMID:10550055 PMID:10766245 PMID:10802669
• ATM se localiza en el núcleo, vesículas citoplasmáticas, centrosoma y peroxisomas, lo que refleja su participación no solo en la reparación del ADN nuclear, sino también en procesos citoplasmáticos como el tráfico vesicular y la pexofagia. Referencias relacionadas: PMID:26344566
• Se expresa de forma ubicua en una amplia gama de tejidos, incluidos páncreas, riñón, músculo esquelético, hígado, pulmón, cerebro y órganos linfoides, lo que coincide con su papel fundamental en la estabilidad del genoma.
• ATM es una fosfoproteína con múltiples sitios de fosforilación, y modificaciones clave regulan su actividad quinasa y su reclutamiento en los sitios de daño del ADN; también sufre acetilación.
• Las mutaciones de pérdida de función en ATM causan ataxia telangiectasia, un trastorno multisistémico caracterizado por neurodegeneración progresiva, inmunodeficiencia y predisposición al cáncer.

Guía experimental y consejos técnicos

• Debido al alto peso molecular de ATM (351 kDa), considere tiempos de transferencia extendidos o tampones de transferencia modificados para Western blotting, a fin de garantizar una transferencia proteica eficiente.
• Para la detección de ATM fosforilado, incluya inhibidores de fosfatasa durante la preparación de la muestra para preservar la señal de fosforilación de S1981.
• En experimentos de inmunoprecipitación (IP/IF-P), valide la especificidad del anticuerpo usando agentes inductores de daño del ADN (por ejemplo, radiación ionizante) para estimular la fosforilación de ATM.
• Para ELISA, establezca concentraciones óptimas de recubrimiento y diluciones del anticuerpo usando controles de fosfopéptido recombinante para garantizar la selectividad por la forma fosforilada de S1981.

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