Anticuerpo Monoclonal de Conejo Phospho-ATR-S428 para WB y ELISA - Q13535

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Serina/treonina proteína quinasa ATR

• ATR es una serina/treonina proteína quinasa de la familia PIKK que actúa como sensor de daño en el ADN, reconociendo secuencias de consenso [ST]-Q y fosforilando objetivos descendentes ante estrés genotóxico (PubMed:10597277, PubMed:10608806, PubMed:10859164). Referencias relacionadas: PMID:10597277, PMID:10608806, PMID:10859164
• Los sustratos clave incluyen CHEK1, BRCA1, p53/TP53, RPA2 y RAD17, cuya fosforilación inhibe la replicación del ADN y la mitosis, y promueve la reparación, la recombinación y la apoptosis (PubMed:11114888, PubMed:11418864, PubMed:11865061). Referencias relacionadas: PMID:11114888, PMID:11418864, PMID:11865061
• Fosforila directamente la histona H2AX en Ser-139 en los sitios de daño y es necesaria para la ubiquitinación de FANCD2 (PubMed:11673449, PubMed:15314022). Referencias relacionadas: PMID:11673449, PMID:15314022
• Crítico para mantener la estabilidad de los sitios frágiles y la duplicación adecuada de los centríolos (PubMed:12526805). Referencias relacionadas: PMID:12526805
• Regula la transición S-G2 restringiendo la actividad de CDK1 durante la fase S (PubMed:30139873). Referencias relacionadas: PMID:30139873
• Actúa en la envoltura nuclear: detecta estrés mecánico, se relocaliza allí para fosforilar CHEK1 y promueve la ruptura de la envoltura nuclear mediante la fosforilación de LMNA; también media la ruptura de micronúcleos y la activación inmune innata cGAS-STING (PubMed:25083873, PubMed:37832547, PubMed:37788673). Referencias relacionadas: PMID:25083873, PMID:37832547, PMID:37788673
• Regula positivamente el reinicio de las horquillas de replicación estancadas tras la activación por el complejo andamio KHDC3L-OOEP.
• Predominantemente nuclear, asociándose con cromosomas y la envoltura nuclear; expresado ubicuamente con mayor presencia en testículos; una isoforma alternativa (isoforma 2) se encuentra solo en páncreas, placenta e hígado.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido fosforilado sintético correspondiente a los residuos alrededor de la Ser-428 de ATR humano; la especificidad debe confirmarse mediante competencia con péptidos fosforilados frente a no fosforilados o lisados tratados con fosfatasa.
• Para la transferencia Western (Western blotting), tenga en cuenta el gran tamaño de ATR (~301 kDa); use geles de gradiente, tiempos de transferencia extendidos y marcadores de alto peso molecular para una detección óptima.
• Las aplicaciones validadas son WB y ELISA; los usuarios finales deben titular el anticuerpo para determinar las concentraciones de trabajo óptimas para sus condiciones de ensayo específicas.
• Dado que ATR es una quinasa de baja abundancia, el enriquecimiento o la inmunoprecipitación previa al WB pueden mejorar la señal en algunos tipos de muestras.
• Almacene el anticuerpo según las condiciones de envío (bolsa de hielo) y evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.

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