Anticuerpo Policlonico contra Fosfo-B-Raf (S445) para WB, ELISA - P15056

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de B-Raf

• Serina/treonina-proteína quinasa que transduce señales mitogénicas desde la membrana celular hasta el núcleo al fosforilar y activar MAP2K1, desencadenando así la vía de transducción de señales de la quinasa MAP (PubMed:21441910, PubMed:29433126). Referencias relacionadas: PMID:21441910, PMID:29433126
• También fosforila PFKFB2, vinculando la señalización por factores de crecimiento a la regulación metabólica (PubMed:36402789). Referencias relacionadas: PMID:36402789
• Puede desempeñar un papel en las respuestas postsinápticas de las neuronas del hipocampo, lo que sugiere su participación en la señalización neuronal (PubMed:1508179). Referencias relacionadas: PMID:1508179
• Se localiza en el núcleo, el citoplasma y la membrana celular, lo que coincide con su función en la transmisión de señales.
• Se expresa principalmente en el cerebro y los testículos, con niveles más bajos en otros tejidos.
• Sufre extensas modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, que regulan su actividad e interacciones.
• Es un protooncogén que se muta frecuentemente en cánceres humanos; las variantes asociadas a enfermedades están vinculadas a cardiomiopatía, sordera, displasia ectodérmica y discapacidad intelectual (según palabras clave de UniProt).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se obtuvo contra un fosfopéptido correspondiente a los residuos alrededor de S445 de la BRAF humana; se espera que reconozca a B‑Raf solo cuando esté fosforilada en este sitio.
• Para WB y ELISA, considere el uso de inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para preservar el estado de fosforilación de S445.
• Al configurar la WB, valide la señal tratando las muestras con fosfatasa lambda o comparándolas con anticuerpos contra B-Raf no específicos para la forma fosforilada.
• Las diluciones de trabajo óptimas para WB y ELISA deben determinarse empíricamente; utilice controles positivos (por ejemplo, lisados de células estimuladas en los que se sabe que se activa la vía MAPK).
• Se ha confirmado la reactividad cruzada con B-Raf de rata; para otras especies, pruebe experimentalmente, ya que la alineación de secuencias puede sugerir reactividad.

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