Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-Bad-S112 para WB, IHC-P, ELISA - Q92934

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Bad (Agonista de la muerte celular asociado a Bcl2)

• Bad (Agonista de la muerte celular asociado a Bcl2, también conocido como componente de unión a Bcl-2 6, proteína similar a Bcl-2 8) es un miembro pro-apoptótico de la familia Bcl-2 que promueve la muerte celular al competir por la unión a las proteínas anti-apoptóticas Bcl-X(L), Bcl-2 y Bcl-W.
• Esta competencia interrumpe la heterodimerización de Bcl-X(L) con BAX, revirtiendo así la actividad represora de la muerte de Bcl-X(L), aunque no la de Bcl-2, y vincula la señalización del receptor del factor de crecimiento con la apoptosis (Por similitud).
• El gen BAD (ID del Gen: 572) codifica un único producto proteico con un peso molecular de aproximadamente 18 kDa, según lo confirmado por UniProt (Q92934, 18392 Da).
• Bad se localiza en la membrana externa mitocondrial y el citoplasma, donde integra señales de supervivencia y muerte; su actividad está estrictamente regulada por modificaciones postraduccionales.
• Se han identificado múltiples modificaciones postraduccionales clave en Bad, incluyendo fosforilación, acetilación y metilación, que modulan su función pro-apoptótica y su localización subcelular.
• La fosforilación en Ser-112 (y sitios circundantes) inactiva a Bad al promover su unión a proteínas 14-3-3 y secuestrarlo en el citoplasma, impidiendo su translocación mitocondrial y la apoptosis.
• Bad se expresa en una amplia variedad de tejidos, lo que es consistente con su papel fundamental en la regulación de la muerte celular programada en diferentes tipos celulares.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno es un fosfopéptido sintético que abarca la S112 de la Bad humana, se espera que este anticuerpo reconozca específicamente la forma fosforilada en Ser-112; es recomendable verificar la fosfo-especificidad utilizando lisados tratados con fosfatasa o un anticuerpo de Bad no fosfo-específico como control.
• Para el análisis de transferencia Western (WB), el peso molecular predicho de Bad es de 18 kDa; en condiciones óptimas, debería detectarse una única banda de aproximadamente este tamaño, aunque los usuarios deben validar la señal en su sistema de muestra y flujo de trabajo experimental.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), la recuperación del antígeno y las condiciones de bloqueo deben optimizarse empíricamente; la localización esperada es mitocondrial y citoplasmática, por lo que los patrones de tinción deben evaluarse en consecuencia.
• En aplicaciones de ELISA, este anticuerpo puede usarse para capturar o detectar Bad fosforilada en lisados celulares o de tejidos; se recomienda validar las condiciones del ensayo con controles positivos y negativos apropiados.
• Dada su reactividad cruzada con Bad de ratón y rata, este anticuerpo es adecuado para estudios en estos organismos modelo comunes; sin embargo, los usuarios deben confirmar que la secuencia alrededor de S112 esté conservada en estas especies.

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