Anticuerpo policlonal de conejo anti-Fosfo-Beclina 1 (Ser15) para WB y ELISA - Q14457

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Beclina-1

• La Beclina-1 (también conocida como proteína de interacción con BCL2 similar a miosina de hélice superenrollada, ATG6 o VPS30) es una proteína central de la autofagia codificada por el gen BECN1.
• La Beclina-1 es una proteína central de la autofagia que funciona como subunidad principal del complejo de PI3K de clase III, mediando la producción de fosfatidilinositol 3-fosfato. Referencias relacionadas: PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933
• Es esencial para la formación de distintos complejos de PI3K: PI3KC3-C1 para la iniciación del autofagosoma y PI3KC3-C2 para la maduración del autofagosoma y la endocitosis. Referencias relacionadas: PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797
• La Beclina-1 está involucrada en el tráfico endocítico y en el paso de abscisión de la citocinesis. Referencias relacionadas: PMID:25275521
• Un fragmento mitocondrial de 35 kDa de la Beclina-1 promueve la apoptosis induciendo la translocación de BAX y la liberación de factores proapoptóticos.
• Se localiza en múltiples orgánulos: citoplasma, aparato de Golgi, endosomas, retículo endoplásmico, mitocondrias, autofagosomas y núcleo, lo que es consistente con sus funciones en el tráfico de membranas.
• La Beclina-1 protege contra la infección por el virus Sindbis neurovirulento, lo que indica un papel en la defensa antiviral.
• La Beclina-1 sufre diversas modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación en Ser15, acetilación y ubiquitinación, que regulan sus funciones.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético específico para Ser15 de la Beclina-1 humana. Para confirmar la especificidad de fosforilación, considere utilizar muestras tratadas con fosfatasa o ensayos de competición con péptido en su configuración experimental.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 52 kDa. Optimice utilizando geles de gradiente y condiciones de transferencia adecuadas para proteínas de este peso molecular.
• Para ELISA, el recubrimiento directo del antígeno fosfopéptido puede ayudar a evaluar la unión del anticuerpo; optimice los tampones de recubrimiento y las condiciones de bloqueo para su formato de placa.
• Se indica reactividad cruzada con la Beclina-1 de ratón y rata; por lo tanto, se pueden utilizar líneas celulares o lisados de tejidos de estas especies para estudios funcionales de autofagia.
• La fosforilación de la Beclina-1 puede ser transitoria; incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y procese las muestras rápidamente para preservar el epítopo fosfo.

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