Anticuerpo Policlonal de Conejo Phospho-BRD4 (S492/S494) para WB, DB, ELISA - O60885

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de BRD4

• BRD4 es un miembro de la familia de dominios bromo y extraterminales (BET), que funciona como un lector de cromatina que se une a histonas acetiladas para transmitir la memoria epigenética a través de las divisiones celulares. Referencias relacionadas: PMID:20871596, PMID:23086925, PMID:23317504
• Permanece asociado con la cromatina acetilada durante todo el ciclo celular, manteniendo la estructura de cromatina de orden superior para la transcripción génica postmitótica G1. Referencias relacionadas: PMID:22334664, PMID:23317504, PMID:23589332
• BRD4 recluta el complejo P-TEFb a los promotores de genes y potenciadores distales, lo que lleva a la fosforilación de la CTD de la ARN polimerasa II y la activación de la transcripción inducible por señales. Referencias relacionadas: PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19596240
• También recluta P-TEFb a RELA acetilada, vinculando BRD4 con la activación de la vía NF-kappa-B. Referencias relacionadas: PMID:19103749
• La fosforilación en residuos como S492 y S494 por CK2 facilita la interacción de BRD4 con los promotores dirigidos por p53/TP53. Referencias relacionadas: PMID:23317504
• En la respuesta al daño del ADN, BRD4 actúa como aislante de cromatina al reclutar condensina-2 a histonas acetiladas, limitando la propagación de la fosforilación de H2A.X.
• BRD4 se localiza en el núcleo y los cromosomas; se expresa de manera ubicua y sufre empalme alternativo y modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y ubiquitinación.
• Además, BRD4 regula la diferenciación de células T CD4+ en células Th17 (Por similitud).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blot, prepare lisados con inhibidores de fosfatasas para preservar la fosforilación y use un gel SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, 6–8%) para una separación óptima de la proteína BRD4 de ~152 kDa.
• Los ensayos de dot blot y ELISA pueden beneficiarse del bloqueo con BSA libre de fósforo para reducir el fondo; confirme la especificidad mediante competencia con péptidos no fosforilados.
• La reactividad del anticuerpo en muestras humanas sugiere su uso con líneas celulares humanas; valide la reactividad cruzada en su sistema objetivo según sea necesario.
• Considere el uso de controles positivos apropiados, como lisados de células tratadas con inhibidores de fosfatasas o inductores conocidos de fosforilación.

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