Phospho-BRD4-T204 mAb de conejo para WB, ELISA - O60885

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de BRD4

• BRD4 (proteína 4 que contiene bromodominio, también conocida como HUNK1) es una proteína lectora de cromatina que reconoce y se une a histonas acetiladas, desempeñando un papel clave en la memoria epigenética y la regulación de la transcripción. Referencias relacionadas: PMID:20871596, PMID:23086925, PMID:23317504
• Permanece asociado a la cromatina acetilada durante todo el ciclo celular, proporcionando memoria epigenética para la transcripción génica de G1 postmitótica al preservar la estructura de la cromatina. Referencias relacionadas: PMID:22334664, PMID:23317504, PMID:23589332
• Durante la interfase, BRD4 regula la transcripción de genes inductibles por señalización al reclutar el complejo P-TEFb a promotores y potenciadores distales, a menudo en colaboración con JMJD6, desplazando a reguladores negativos como HEXIM1 y 7SKsnRNA. Referencias relacionadas: PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19596240
• BRD4 también se une a RELA acetilado, activando la señalización de NF-kappa-B al reclutar P-TEFb. Referencias relacionadas: PMID:19103749
• Después de la fosforilación por CK2, BRD4 se recluta a los promotores diana de p53/TP53, regulando la transcripción mediada por p53. Referencias relacionadas: PMID:23317504
• En la respuesta al daño del ADN, BRD4 actúa como aislador de cromatina al reclutar el complejo condensin-2, inhibiendo así la señalización por daño del ADN y limitando la propagación de la fosforilación de H2AX.
• Expresado de forma ubicua, BRD4 se localiza en el núcleo y los cromosomas, y sufre diversas modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, acetilación y ubiquitinación.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para Western blot (WB), utilice un protocolo estándar de SDS-PAGE con geles al 8% o geles de gradiente para resolver eficazmente la proteína BRD4 de ~152 kDa. Incluya inhibidores de fosfatasas en los buffers de lisis para preservar la fosforilación en T204.
• Valide la especificidad del anticuerpo mediante ensayos de competición con péptido no fosforilado o tratamiento con fosfatasa.
• Para ELISA, considere el uso de péptidos fosforilados y no fosforilados para evaluar la especificidad; optimice la concentración de recubrimiento.

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