Fosfo-BRD4-T249 pAb de conejo para WB - O60885

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de BRD4

• BRD4 (proteína que contiene dominio de bromodominio 4, también conocida como HUNK1) es un lector de cromatina que reconoce y se une a histonas acetiladas, desempeñando un papel clave en la transmisión de la memoria epigenética a través de las divisiones celulares y la regulación de la transcripción. Referencias relacionadas: PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504
• Permanece asociado con la cromatina acetilada durante todo el ciclo celular, preservando el estado de la cromatina acetilada y manteniendo la estructura de orden superior de la cromatina para la transcripción génica postmitótica G1. Referencias relacionadas: PMID:22334664 PMID:23317504 PMID:23589332
• Durante la interfase, BRD4 regula la transcripción de genes inducibles por señales al reclutar el complejo P-TEFb a los promotores y potenciadores distales, facilitando la fosforilación de la CTD de la ARN polimerasa II y la elongación productiva. Referencias relacionadas: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240
• BRD4 se une a RELA acetilada para activar la señalización NF-kappa-B y, tras la fosforilación por CK2, es reclutado a los promotores diana de p53/TP53 para regular la transcripción mediada por p53. Referencias relacionadas: PMID:19103749 PMID:23317504
• En la respuesta al daño en el ADN, BRD4 actúa como aislante de cromatina al reclutar el complejo condensina-2 a las histonas acetiladas, limitando la propagación de la fosforilación de la histona H2AX.
• Se expresa de forma ubicua y se localiza en el núcleo y la cromatina.
• Modificado postraduccionalmente por acetilación y fosforilación; contiene dos bromodominios; participa en reordenamientos cromosómicos vinculados al cáncer; interactúa con proteínas virales.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético fosforilado alrededor de Thr249 de BRD4 humano. Para confirmar la especificidad de la fosforilación, considere usar un anticuerpo BRD4 no específico para fosfo como control en experimentos paralelos.
• Para la transferencia Western (WB), se espera una banda de aproximadamente 152 kDa. Use un porcentaje de gel adecuado (p. ej., poliacrilamida al 8%) y optimice las condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular.
• Valide el anticuerpo en una línea celular relevante (p. ej., HeLa, Jurkat) con estado de fosforilación de BRD4 conocido. Incluya cócteles de inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar las señales de fosforilación.
• Dado que se informa reactividad cruzada para ratón y rata, este anticuerpo puede ser adecuado para estudios en modelos de roedores; incluya controles positivos específicos de la especie para su verificación.