Fosfo-CDK1-Y15 mAb de conejo para WB, ELISA - P06493

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CDK1

• La cinasa dependiente de ciclina 1 (CDK1), también conocida como CDC2 o proteína cinasa p34, es una serina/treonina-proteína cinasa que desempeña un papel fundamental en el ciclo celular eucariota, promoviendo la transición G2-M y el inicio mitótico (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720). Referencias relacionadas: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720
• Fosforila una amplia gama de sustratos, incluyendo láminas, histona H1, tau y vimentina, para orquestar la separación de los centrosomas, la desintegración de la envoltura nuclear y la condensación de los cromosomas (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720, PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730). Referencias relacionadas: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720 PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• La actividad de CDK1 está regulada estrictamente por la fosforilación/desfosforilación en Thr14 y Tyr15. La fosforilación mediada por WEE1 y PKMYT1 en Tyr15 inhibe CDK1, mientras que las fosfatasas CDC25 eliminan este fosfato inhibidor para impulsar la entrada mitótica (PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730, PubMed:20395957). Referencias relacionadas: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730 PMID:20395957
• En respuesta al daño en el ADN, CDK1 se fosforila en Tyr15 y se inhibe, lo que conduce a una detención en G2 para la reparación del ADN; la fosfatasa WIP1 reactiva CDK1 una vez completada la reparación (PubMed:20360007, PubMed:20395957). Referencias relacionadas: PMID:20360007 PMID:20395957
• CDK1 se localiza en el núcleo, el citoplasma, las mitocondrias, el centrosoma y el huso, lo que refleja sus múltiples roles mitóticos.
• Se encuentra en niveles elevados en tejidos de cáncer de mama, lo que lo convierte en un potencial objetivo diagnóstico y terapéutico.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético que abarca la Tyr15 de CDK1 humano; por lo tanto, el anticuerpo reconoce específicamente la forma fosforilada.
• Para la transferencia Western (Western blotting), espere una banda a ~34 kDa. Use inhibidores de fosfatasas en el tampón de lisis para preservar la fosforilación.
• La especificidad se puede verificar tratando las muestras con lambda fosfatasa o realizando ensayos de competencia con péptidos con el péptido fosforilado y no fosforilado.
• Este anticuerpo está validado para muestras humanas; la reactividad cruzada con otras especies no se ha determinado.
• Para ELISA, considere usar el fosfopéptido como antígeno de captura y un anticuerpo total de CDK1 como detección para la normalización.

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