Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Fosfo-CEBPB (T235) para WB, IHC-P, ELISA - P17676

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CEBPB

• CEBPB (C/EBP-beta, NF-IL6, TCF-5) es un miembro de la familia de factores de transcripción CCAAT/enhancer-binding protein y funciona como un regulador crítico de las respuestas inmunes e inflamatorias, adipogénesis, regeneración hepática y hematopoyesis. Referencias relacionadas: PMID:12048245, PMID:1741402, PMID:18647749

• La proteína se une al motivo de consenso de ADN 5'-T[TG]NNGNAA[TG]-3' y regula la transcripción de genes de fase aguda y citoquinas, desempeñando un papel central en la respuesta inflamatoria y en la eliminación de bacterias intracelulares.

• Durante la adipogénesis, CEBPB se expresa rápidamente y tras la fosforilación induce CEBPA y PPARG, que impulsan la expresión de genes específicos de adipocitos. La transactivación retardada parece necesaria para permitir la expansión clonal mitótica y la diferenciación terminal. Referencias relacionadas: PMID:20829347

• La isoforma LIP funciona como un regulador dominante negativo mediante heterodimerización con la isoforma LAP. CEBPB también promueve la diferenciación de osteoblastos y la osteoclastogénesis. Referencias relacionadas: PMID:11741938

• CEBPB se localiza principalmente en el núcleo, pero también puede detectarse en el citoplasma, lo que es consistente con su papel de traslación en la activación transcripcional dependiente de señal.

• Las modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, modulan su actividad transcripcional y estabilidad de la proteína.

• La expresión tisular es amplia pero baja; se observan niveles detectables en pulmón, riñón y bazo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo monoclonal de conejo recombinante se generó contra un péptido fosforilado sintético alrededor de la treonina 235. Confirme la fosfo-especificidad mediante tratamiento de las muestras con fosfatasa o mediante inhibición competitiva con péptido no fosforilado en su sistema de ensayo.
• Para Western blot, espere una banda principal alrededor de 36 kDa. Utilice lisados recién preparados e inhibidores de fosfatasas para preservar la señal de fosforilación. Optimice las condiciones de bloqueo e incubación con anticuerpos para minimizar la unión inespecífica.
• En aplicaciones de IHC-P, el método de recuperación de antígeno y las condiciones de fijación pueden afectar la integridad del epítopo fosfo. Considere probar tejidos de control positivo conocidos, como macrófagos estimulados con lipopolisacárido (LPS) o adipocitos en diferenciación, para validar la tinción.
• Para ELISA, incluya controles de péptido tanto fosforilado como no fosforilado para establecer la especificidad y el rango dinámico del ensayo.

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