Anticuerpo Policlonal de Conejo Phospho-Chk1-S317 (WB, ELISA) - O14757

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Chk1

• La serina/treonina proteína quinasa Chk1 (CHEK1) es una quinasa crítica del punto de control del ciclo celular que asegura la integridad del genoma mediante la mediación de la detención del ciclo celular y la reparación del ADN ante daños en el ADN o estrés de replicación. Referencias relacionadas: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Chk1 fosforila CDC25A, CDC25B y CDC25C, lo que conduce a su inhibición mediante la unión a 14-3-3 o la degradación proteasómica, evitando así la activación de CDK-ciclina y bloqueando la progresión del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511, PMID:19734889, PMID:20090422
• Fosforila directamente a RAD51 en Thr-309 para promover la reparación por recombinación homóloga, a TP53 en múltiples sitios C-terminales para mejorar su activación y la detención del ciclo celular, y a FANCE para facilitar la reparación de entrecruzamientos de ADN. Referencias relacionadas: PMID:15665856, PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572, PMID:17296736
• Chk1 fosforila TLK1 en Ser-743, evitando la fosforilación de ASF1A y mejorando el ensamblaje de cromatina, y también regula PCNA para el mantenimiento del horquilla de replicación. Referencias relacionadas: PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:18451105
• Además, Chk1 fosforila la histona H3.1 (H3T11ph) para silenciar genes epigenéticamente, fosforila RB1 para promover la interacción con E2F, y dirige SPRTN y PABIR1/FAM122A para modular el estrés de replicación y el punto de control G2/M. Referencias relacionadas: PMID:17380128, PMID:31316063, PMID:33108758
• Una variante de empalme endógena actúa como represor de Chk1 de longitud completa, antagonizando su función para promover la transición de S a G2/M.
• Subcelularmente, Chk1 se localiza en el núcleo, cromosomas, citoplasma y centrosomas, con enriquecimiento en el centrosoma durante la mitosis.
• Se expresa de manera ubicua, con los niveles más altos en el timo, testículos, intestino delgado y colon.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético alrededor de Ser317; asegúrese de que la preparación de la muestra incluya inhibidores de fosfatasas para preservar la fosforilación endógena en este sitio.
• Para Western blotting, se espera una banda específica a ~54 kDa. Valide la especificidad tratando los lisados celulares con lambda fosfatasa o utilizando anticuerpos Chk1 no específicos para fosfo como controles.
• En ELISA, use péptido inmovilizado o lisados celulares y considere el bloqueo con péptidos fosforilados versus no fosforilados para confirmar la especificidad de fosfo.
• Optimice la dilución del anticuerpo para su sistema experimental específico; las diluciones iniciales típicas para WB son de 1:500–1:2000, pero se recomienda la determinación empírica.
• La reactividad cruzada se ha confirmado para muestras humanas; para otras especies, verifique la homología de secuencia alrededor de Ser317 y pruebe experimentalmente.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

CamelBio proporciona a fabricantes de diagnóstico, laboratorios e instituciones de investigación acceso simplificado a un amplio portafolio de materias primas para IVD, que incluye pares de anticuerpos validados, anticuerpos monoclonales y policlonales optimizados y reactivos auxiliares a granel. Para proyectos dirigidos a la respuesta al daño en el ADN y la regulación del ciclo celular, podemos abastecer y suministrar materias primas de objetivos raros, como anticuerpos específicos de fosfo para Chk1 y quinasas de puntos de control relacionadas. Ya sea que necesite un solo reactivo o un panel personalizado completo, CamelBio es su socio desde el concepto hasta la clínica.