Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-Chk1-S345 para WB, ELISA - O14757

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Phospho-Chk1-S345

• La serina/treonina-proteína quinasa Chk1, codificada por el gen CHEK1, también se conoce como homólogo del punto de control CHK1, quinasa del punto de control del ciclo celular y quinasa del punto de control-1.
• Es necesaria para la detención del ciclo celular mediada por puntos de control y la activación de la reparación del ADN en respuesta a daño en el ADN o ADN no replicado. Referencias relacionadas: PMID:11535615 PMID:12399544 PMID:12446774
• Se une y fosforila a CDC25A, CDC25B y CDC25C, creando sitios de unión para 14-3-3 que inhiben su actividad fosfatasa y promueven la degradación de CDC25A, bloqueando finalmente la progresión del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:9278511 PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:19734889 PMID:20090422
• Fosforila RAD51 en Thr-309, promoviendo su liberación de BRCA2 y mejorando la asociación con la cromatina para la reparación por recombinación homóloga. Referencias relacionadas: PMID:15665856
• Fosforila múltiples sitios en el extremo C-terminal de TP53, facilitando su activación dependiente de acetilación para inducir la detención del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• También fosforila NEK6, TLK1, FANCE, SPRTN y PABIR1/FAM122A, contribuyendo a diversos procesos como el ensamblaje de la cromatina, la reparación de enlaces cruzados de ADN y la respuesta al estrés de replicación. Referencias relacionadas: PMID:18728393 PMID:12660173 PMID:12955071 PMID:17296736 PMID:31316063 PMID:33108758
• Se localiza predominantemente en el núcleo y los cromosomas, pero también se encuentra en el citoplasma, el citoesqueleto y el centrosoma.
• Se expresa de forma ubicua, con los niveles más altos en el timo, testículos, intestino delgado y colon.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El diseño del inmunógeno utiliza un péptido sintético fosforilado alrededor de Ser345 de la Chk1 humana; confirme la especificidad tratando lisados con fosfatasa lambda para abolir la señal.
• Para western blot, considere usar agentes inductores de daño en el ADN (por ejemplo, etopósido, hidroxiurea) para enriquecer la Chk1-S345 fosforilada en líneas celulares humanas o de ratón.
• ELISA se puede realizar con péptido capturado o lisados; incluya péptido no fosforilado como control negativo para verificar la especificidad de fosforilación.
• Se informa reactividad cruzada de especies para humano y ratón; valide el rendimiento en la especie objetivo antes de estudios a gran escala.

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