Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-CREB1-S133 para WB, IHC-P, FC (intra), ELISA - P16220

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CREB1

• La proteína de unión al elemento de respuesta a AMP cíclico 1 (CREB1) es un factor de transcripción dependiente de fosforilación que se une al elemento de respuesta a AMPc (CRE) en el ADN.
• CREB1 estimula la transcripción al unirse a CRE, una secuencia presente en muchos promotores virales y celulares; la activación se ve potenciada por los coactivadores TORC que actúan independientemente de la fosforilación de Ser-119. Referencias relacionadas: PMID:14536081
• Está involucrado en diversos procesos celulares, incluyendo la sincronización de la ritmicidad circadiana y la diferenciación de las células adiposas.
• En cardiomiocitos, CREB1 regula la expresión de factores de respuesta apoptótica e inflamatoria en respuesta a la señalización de AKT mediada por ERFE.
• La proteína se localiza exclusivamente en el núcleo, lo que coincide con su función como factor de transcripción.
• CREB1 es una fosfoproteína sujeta a splicing alternativo y se ha identificado en reordenamientos cromosómicos, lo que pone de manifiesto su complejidad regulatoria y relevancia para las enfermedades.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo detecta un sitio de fosforilación; para preservar la señal, considere agregar inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra.
• Para Western blotting, ejecute corridas paralelas con un anticuerpo pan-CREB para distinguir los cambios en la fosforilación de los niveles totales de proteína.
• En IHC-P, ciertos métodos de recuperación de antígeno pueden desfosforilar el epítopo; optimice las condiciones de recuperación (por ejemplo, calor más suave o recuperación enzimática) para mantener la reactividad.
• Durante la citometría de flujo intracelular, utilice protocolos de fijación y permeabilización diseñados para retener los epítopos fosforilados e incluya controles de isotipo adecuados.
• Los formatos de ELISA deben validarse en la matriz biológica correspondiente; considere utilizar un enfoque de captura o detección fosfoespecífico para obtener una sensibilidad óptima.

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