Anticuerpo Policlonal de Conejo Fosfo-Ciclina E1-T395 para WB, IF/ICC, ELISA - P24864

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Ciclina E1

• La Ciclina E1 es una ciclina específica de G1/S esencial para el control del ciclo celular en la transición G1/S. Forma complejos y activa la cinasa dependiente de ciclina 2 (CDK2), impulsando la progresión de la fase G1 a la fase S.
• Pertenece a la familia de las ciclinas, un grupo de proteínas reguladoras cuyas concentraciones oscilan durante el ciclo celular y gobiernan puntos de control clave.
• La proteína se localiza predominantemente en el núcleo, lo cual es consistente con su función en la regulación de la transcripción y la maquinaria del ciclo celular.
• La expresión tisular es más alta en testículos y placenta, con niveles bajos en células epiteliales bronquiales, lo que refleja su función en tejidos proliferativos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación en múltiples residuos (como T395), la ubiquitinación y la potencial sumoilación, que modulan la estabilidad y actividad de la proteína.
• El splicing alternativo genera isoformas con regulación distinta y posiblemente funciones específicas de tejido.
• El peso molecular calculado es de aproximadamente 47.077 Da (UniProt), consistente con la banda observada de ~47 kDa en western blotting.
• Las anotaciones de UniProt destacan su participación en la división celular, la regulación de la cinasa dependiente de ciclina y la identificación por proteómica, subrayando su importancia en la proliferación celular normal y cancerosa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un fosfo-péptido sintético que rodea la T395, lo que hace que este anticuerpo sea ideal para detectar específicamente la Ciclina E1 fosforilada en este residuo. Para confirmar la especificidad fosfo, considere tratar las muestras con λ-fosfatasa o utilizar bloqueo con péptido no fosforilado.
• En western blotting, se espera una banda alrededor de 47 kDa; sin embargo, valide el peso molecular en su sistema de muestra específico, ya que las modificaciones postraduccionales pueden alterar la migración.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, anticipe una tinción nuclear. Incluya DAPI u otro contraste nuclear para verificar la localización, y use condiciones apropiadas de fijación/permeabilización para preservar los epítopos fosforilados.
• Al aplicar en ELISA, el anticuerpo puede capturar o detectar la Ciclina E1 fosforilada en lisados; optimice los pasos de recubrimiento y detección para su formato de ensayo.
• Se informa reactividad cruzada para humano, ratón y rata; si utiliza otras especies, realice una alineación de secuencias alrededor de la T395 y una validación preliminar.

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