pAb de conejo Phospho-EGFR-Y1086 para WB, ELISA - P00533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EGFR

• EGFR (Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico), también denominado ErbB-1 o HER1, es un miembro de la familia ErbB de receptores tirosina quinasas. Se expresa ampliamente en epitelios y otros tejidos. Una isoforma alternativa (isoforma 2) puede funcionar como antagonista de la acción del EGF.
• EGFR se une a múltiples ligandos de la familia EGF, incluyendo EGF, TGF-α, amfirregulina y epigen, lo que conduce a la dimerización del receptor y la autofosforilación en residuos de tirosina citoplasmáticos. Referencias relacionadas: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Tras la activación, EGFR recluta proteínas adaptadoras y estimula cascadas de señalización principales como las vías RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC y STAT, que regulan la proliferación, la supervivencia y la diferenciación. Referencias relacionadas: PMID:27153536
• EGFR también activa la señalización de NF-kappa-B y puede fosforilar directamente proteínas sustrato como RGS16 (modulador de señalización de proteínas G), MUC1 (adhesión celular/Wnt) y CCDC88A/GIV (promotor de migración), vinculando su actividad a diversos procesos celulares. Referencias relacionadas: PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• Subcelularmente, EGFR se localiza principalmente en la membrana celular, pero también se detecta en el retículo endoplásmico, el Golgi, el núcleo, los endosomas y puede ser secretado.
• Se expresa de forma ubicua en tejidos humanos; la isoforma 2 se expresa notablemente en cánceres de ovario.
• (Infección microbiana) EGFR actúa como receptor de la célula huésped para la entrada del virus de la hepatitis C (VHC) en los hepatocitos, al facilitar la formación del complejo receptor CD81-CLDN1.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno de este anticuerpo es un fosfopéptido sintético alrededor de Y1086 del EGFR humano, diseñado para reconocer específicamente la forma fosforilada.
• Para Western blot, prepare lisados de líneas celulares humanas positivas para EGFR (por ejemplo, A431 o HeLa) con y sin estimulación con EGF; una banda de ~134 kDa confirma la detección.
• Para ELISA, utilice el anticuerpo para capturar o detectar EGFR fosforilado en lisados de células humanas o extractos de tejido; optimice las condiciones de recubrimiento y detección según su plataforma de ensayo.
• Asegúrese de incluir cócteles de inhibidores de fosfatasas durante la lisis y el manejo de muestras para preservar la señal de fosforilación.
• Dado que la reactividad cruzada está limitada al EGFR humano, valide el anticuerpo en sus sistemas de muestra humanos.

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