Anticuerpo Policlonal de Conejo Phospho-EGFR (Y1148) para WB, ELISA - P00533

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del EGFR

• El EGFR es una tirosina quinasa de receptores que se une a ligandos de la familia EGF (EGF, TGF-alfa, AREG, epigen, betacelulina, epiregulina, HB-EGF) y desencadena la dimerización del receptor y la autofosforilación en residuos de tirosina clave, incluyendo Y1148. Referencias relacionadas: PMID:10805725, PMID:27153536
• El EGFR autofosforilado sirve como sitio de acoplamiento para proteínas adaptadoras como GRB2, activando cascadas de señalización descendente: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC y módulos STAT. También activa NF-kappa-B y fosforila directamente RGS16 y MUC1, acoplándose a las vías de las proteínas G y la beta-catenina. Referencias relacionadas: PMID:27153536, PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589
• El EGFR regula positivamente la migración celular a través de la interacción con CCDC88A/GIV, y contribuye al aprendizaje, la memoria y la señalización del dolor. Referencias relacionadas: PMID:20462955
• La isoforma 2 puede actuar como antagonista de la acción del EGF y también se expresa en cánceres de ovario; en general, el EGFR se expresa de forma ubicua.
• Subcelularmente, el EGFR reside en la membrana celular, RE, Golgi, núcleo, endosomas y se secreta.
• En la infección viral, el EGFR actúa como receptor para el virus de la hepatitis C (VHC), mediando la entrada al promover la formación del complejo CD81-CLDN1.
• Palabras clave: receptor, tirosina-proteína quinasa, protooncogén, fosfoproteína, glucoproteína; crítica para la transducción de señales y a menudo desregulada en el cáncer.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blot, utilice un marcador de peso molecular apropiado para 134 kDa e incluya lisados de control positivo de líneas celulares humanas estimuladas con EGF para confirmar la especificidad fosfo-específica.
• Verifique la dependencia de la fosforilación tratando las muestras con lambda fosfatasa antes del inmunoblotteo; la pérdida de señal confirma la unión fosfo-específica.
• Para ELISA, considere recubrir con péptido fosforilado y controles de péptido no fosforilado para evaluar la reactividad cruzada; optimice la dilución del anticuerpo y las condiciones de detección.
• Dado que este anticuerpo es policlonal de conejo, se recomienda un anticuerpo secundario anti-conejo conjugado con HRP; utilice bloqueo con BSA para minimizar la unión inespecífica.

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