Anticuerpo policlonal de conejo Phospho-EGFR-Y869 para WB y ELISA - P00533

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EGFR

• EGFR es una receptor tirosina quinasa que se une a ligandos de la familia EGF (incluyendo EGF, TGF-alfa, AREG, epigen, betacelulina, epirregulina y HBEGF), lo que induce la dimerización del receptor y su autofosforilación. Referencias relacionadas: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029

• El EGFR activado por ligando desencadena múltiples cascadas de señalización intracelular, incluyendo los módulos RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 quinasa-AKT, PLCgamma-PKC y STAT, además de la señalización de NF-kappa-B. Referencias relacionadas: PMID:27153536 PMID:11116146

• EGFR fosforila directamente otras proteínas como RGS16 (aumentando su actividad GTPasa) y MUC1 (promoviendo su interacción con SRC y beta-catenina), conectando con vías de proteína G y de adhesión celular. Referencias relacionadas: PMID:11602604 PMID:11483589

• EGFR regula positivamente la migración celular al interactuar con CCDC88A/GIV, que retiene a EGFR en la membrana celular y mantiene la señalización sostenida. Referencias relacionadas: PMID:20462955

• El gen EGFR (también conocido como ERBB1, HER1) codifica una receptor tirosina quinasa que pertenece a la familia ERBB; una isoforma obtenida por splicing alternativo (isoforma 2) puede actuar como antagonista de la acción del EGF y se expresa en cánceres de ovario.

• EGFR se localiza predominantemente en la membrana celular, pero también se detecta en el retículo endoplásmico, el aparato de Golgi, la membrana nuclear, los endosomas y puede ser secretado.

• EGFR es una fosfoproteína con sitios clave de fosforilación en tirosina (incluyendo Y869) que regulan su actividad quinasa, y sufre glicosilación, ubiquitinación y otras modificaciones postraduccionales.

• Se expresa de forma ubicua en tejidos humanos; EGFR actúa como receptor celular para el virus de la hepatitis C (VHC), facilitando la entrada viral en los hepatocitos.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un fosfopéptido sintético correspondiente a los residuos alrededor de Y869 del EGFR humano. Para confirmar la fosfoespecificidad, incluya controles tratados con fosfatasa o realice competición con péptido no fosforilado.
• Para western blot, utilice lisados de células estimuladas con EGF y espere una banda de ~134 kDa; se ha informado de reactividad cruzada con EGFR de ratón y rata, pero valide esto en la especie de su interés.
• Para ELISA, considere recubrir la placa con el péptido fosforilado y optimizar las condiciones de bloqueo y detección para mejorar la relación señal-ruido.
• Evite condiciones de despojado duras al volver a sondear las membranas, ya que esto puede eliminar la señal fosfoespecífica.

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