Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Fosfo-eIF4EBP1-T37/T46 para WB y ELISA - Q13541

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de eIF4EBP1

• eIF4EBP1 (Proteína de unión al factor de iniciación de la traducción eucariota 4E 1), también conocida como PHAS-I, es un represor clave de la iniciación de la traducción.
• Regula la actividad de EIF4E compitiendo con EIF4G1/EIF4G3 por la unión a EIF4E. En su estado hipofosforilado, se une fuertemente a EIF4E e inhibe la traducción dependiente de cap. La hiperfosforilación, en respuesta a señales de crecimiento, provoca su disociación de EIF4E, permitiendo el ensamblaje del complejo eIF4F y la iniciación de la traducción.
• Actúa como efector aguas abajo de las vías de mTORC1 y MAP quinasa, mediando la síntesis de proteínas en respuesta a hormonas, factores de crecimiento y nutrientes.
• Se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, acorde con su función en la modulación de la traducción y posiblemente en funciones nucleares.
• Sufre modificaciones postraduccionales extensas que incluyen fosforilación (p. ej., en T37, T46, T70, S65), acetilación y ubiquitinación (notadas como enlace isopeptídico y conjugación Ubl), que regulan colectivamente su actividad y estabilidad.
• Peso molecular aproximado de 13 kDa (12580 Da) según la secuencia, aunque la migración en SDS-PAGE puede variar debido a los estados de fosforilación.
• Clasificada como inhibidor de la síntesis de proteínas, fosfoproteína, y pertenece a la familia de regulación de la traducción; también identificada en estudios de proteómica como componente del proteoma de referencia.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo reconoce niveles endógenos de eIF4EBP1 solo cuando está fosforilado en Thr37 y Thr46.
• Para Western blot, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar las señales de fosforilación. La banda principal típicamente migra alrededor de 13-20 kDa; pueden aparecer múltiples bandas debido a la fosforilación diferencial.
• Valide la señal fosfo-específica tratando células con estímulos (p. ej., insulina, suero) para inducir fosforilación, y opcionalmente utilice tratamiento con fosfatasa o competición con péptido no fosforilado.
• Para ELISA, optimice las condiciones de recubrimiento y la concentración de anticuerpo; considere emparejarlo con un anticuerpo anti-eIF4EBP1 total para normalización.
• Se ha demostrado reactividad cruzada en humano y rata; para ratón, a pesar de la homología de secuencia, la reactividad no figura en los datos de reactividad cruzada; puede ser necesaria validación en muestras de ratón.

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