Anticuerpo monoclonal de conejo Phospho-EPHA2-S897 para WB, IF/ICC, ELISA - P29317

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de EPHA2

• EPHA2 (Receptor de efrina tipo A 2) es una receptor tirosina quinasa codificada por el gen EPHA2 en humanos, que produce múltiples isoformas mediante empalme alternativo (UniProt: P29317).
• Tras unirse a ligandos de efrina-A en células adyacentes, EPHA2 media la señalización bidireccional dependiente de contacto: señalización hacia adelante a través del receptor y señalización inversa a través del ligando.
• Regula procesos celulares diversos que incluyen adhesión celular, migración, proliferación y diferenciación, en parte al inhibir la vía de señalización ERK1/ERK2 (MAPK3/MAPK1).
• EPHA2 desempeña papeles cruciales en procesos del desarrollo como la angiogénesis, desarrollo del romboencéfalo, morfogénesis ramificada de la glándula mamaria y organización y transparencia de las fibras del cristalino.
• Subcelularmente, EPHA2 se localiza en la membrana celular, particularmente en las membranas de los pliegues y lamellipodios, y en las uniones celulares y adhesiones focales.
• En contextos patológicos, EPHA2 funciona como receptor de la célula huésped para la entrada del virus de la hepatitis C (VHC) en hepatocitos y para la entrada del citomegalovirus humano (CMVH) en células de glioblastoma.
• La proteína sufre abundantes modificaciones postraduccionales, entre ellas fosforilación, glicosilación y ubiquitinación; la fosforilación en S897 es un sitio regulador clave en la señalización y las funciones posteriores.

Guía experimental y consejos técnicos

• Al ser un anticuerpo fosfoespecífico, su reactividad depende del estado de fosforilación de S897; valide la especificidad comparando señales entre muestras estimuladas/no estimuladas o tratadas con fosfatasa.
• Para Western blotting, considere usar protocolos de desnudación suaves si va a volver a sondear para EPHA2 total, ya que condiciones duras pueden afectar al epítopo fosforilado.
• En inmunofluorescencia, optimice las condiciones de fijación y permeabilización para preservar el epítopo fosforilado; se recomienda realizar pruebas con controles positivos conocidos.
• Aunque el anticuerpo está validado para humanos y ratones, debe verificarse la reactividad cruzada con otras especies si es necesario.

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