Anticuerpo Policlonal de Conejo Fosfo-ERK1-T202 + ERK2-T185 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P28482 / P27361

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ERK1/ERK2

• ERK2 (MAPK1, también conocida como p42-MAPK) y ERK1 (MAPK3, p44-MAPK) son las dos principales quinasas activadas por mitógenos que constituyen el núcleo de la cascada de señalización MAPK/ERK, transduciendo señales extracelulares para regular el destino celular.
• La vía MAPK/ERK controla un amplio espectro de procesos celulares, incluidos proliferación, diferenciación, adhesión, supervivencia y apoptosis, fosforilando más de 160 sustratos aguas abajo, como factores de transcripción (p. ej., ELK1, FOS, ATF2), quinasas proteicas (p. ej., RSK, MSK, MNK) y reguladores del citoesqueleto.
• Tras la activación, ERK1/2 fosforila GLI1 para promover su disociación de SUFU y su translocación nuclear, modulando así positivamente la señalización de smoothened.
  Referencias relacionadas: PMID:35831023
• En respuesta a la hipoxia, ERK2 fosforila la fosfoglicerato quinasa PGK1, dirigiéndola a la mitocondria para suprimir la producción de acetil-CoA a partir de piruvato.
  Referencias relacionadas: PMID:26942675
• La quinasa se localiza en múltiples compartimentos subcelulares: citoplasma, núcleo, citoesqueleto (huso, centrosoma), adhesiones focales y caveolas de membrana, lo que permite una señalización dependiente del contexto.
• La activación requiere fosforilación dual en el motivo Thr-Glu-Tir (T185 e Y187 en ERK2; T202 e Y204 en ERK1) por quinasas MEK aguas arriba; este anticuerpo detecta específicamente la T185 (ERK2) y T202 (ERK1) fosforiladas.
• Más allá de su actividad quinasa, ERK2 también funciona como un represor transcripcional al unirse a elementos promotores ricos en GC de forma independiente a su actividad catalítica, modulando genes sensibles al interferón.
• Palabras clave: Acetilación, Empalme alternativo, Apoptosis, Unión a ATP, Ciclo celular, Unión celular, Citoplasma, Citoesqueleto, Unión a ADN, Interacción huésped-virus, Quinasa, Membrana, Unión a nucleótidos, Núcleo, Fosfoproteína, Represor, Serina/treonina-proteína quinasa, Transcripción, Regulación de la transcripción, Conjugación Ubl.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para preservar la fosforilación durante la preparación de la muestra, incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y evite el manejo prolongado de la muestra a temperatura ambiente.
• Valide la especificidad del anticuerpo tratando lisados celulares con fosfatasa lambda proteica; espere una pérdida completa de la señal en Western blot.
• En IHC-P, optimice las condiciones de recuperación antigénica (p. ej., tampón citrato pH 6.0) y considere usar un protocolo de amplificación de señal fosfo-específico para mejorar la detección de dianas fosforiladas de baja abundancia.
• Para IF/ICC, fije las células con formaldehído y permeabilice con metanol; confirme la colocalización con marcadores subcelulares conocidos (p. ej., DAPI nuclear, marcadores del Golgi) basándose en la localización esperada tras la estimulación.
• Bandas esperadas: ~38–43 kDa para las isoformas de ERK1/ERK2; pueden aparecer múltiples bandas debido a estados de fosforilación o variantes de empalme.

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