mAb de conejo anti Fosfo-ERK1 (T202/Y204) + ERK2 (T185/Y187) para WB, IHC-P, ELISA - P27361/P28482

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ERK1/2

• La proteína quinasa activada por mitógenos 3 (MAPK3/ERK1) es una serina/treonina quinasa que actúa como componente esencial de la vía de transducción de señales de las MAP quinasas, mediando diversas funciones biológicas como el crecimiento celular, la adhesión, la supervivencia y la diferenciación. Referencias relacionadas: PMID:34497368
• ERK1 fosforila más de 160 sustratos conocidos localizados en el núcleo (por ejemplo, los factores de transcripción ATF2, ELK1, FOS) y en el citosol (por ejemplo, elementos citoesqueléticos, reguladores de la apoptosis y la traducción), lo que permite un control amplio sobre la transcripción, la traducción y la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:35216969
• En células en reposo, ERK1 es predominantemente citoplasmático, pero después de la estimulación se transloca al núcleo. También se localiza en las caveolas de la membrana, las uniones celulares y las adhesiones focales, lo que pone de relieve su papel en la integración de señales y la reorganización citoesquelética.
• La cascada MAPK/ERK, que incluye a ERK1, participa en la regulación de la dinámica endosomal, el procesamiento lisosomal, el reciclaje endosomal a través del compartimento de reciclaje perinuclear (PNRC) y la fragmentación del aparato de Golgi durante la mitosis.
• ERK1 sufre múltiples modificaciones postraduccionales que incluyen la fosforilación (Thr-202/Tyr-204), la acetilación y la ubiquitinación, y está implicado en el control del ciclo celular, las interacciones huésped-virus y la apoptosis.

Guía experimental y consejos técnicos

• Basado en el inmunógeno de fosfopéptido sintético alrededor de T202/Y204 de ERK1 humano, este anticuerpo está diseñado para reconocer la forma activa doblemente fosforilada de ERK1 y presenta reactividad cruzada con los sitios fosforilados correspondientes (T185/Y187) en ERK2 debido a la alta homología de secuencia. Incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para preservar la fosforilación.
• Para Western Blot, se espera una banda alrededor de ~42-44 kDa. Para mantener la integridad de la señal de fosforilación, utilice tampones de elución suaves o prepare muestras frescas para sondeos repetidos en lugar de eluciones duras.
• En IHC-P, se puede aplicar una recuperación de antígeno estándar (por ejemplo, tampón de citrato, pH 6.0). Incluya controles de tejido tanto estimulados como no estimulados para confirmar la fosfoespecificidad.
• Para ELISA, un formato sándwich que utiliza un anticuerpo de captura anti ERK total emparejado con este anticuerpo de detección permite cuantificar ERK1/2 activo en lisados u homogenados.

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